C ₁ и C ₂ представляют собой две нити ДНК шпилечной структуры, которые могут существовать в растворе одновременно и могут оставаться стабильными без какой-либо гибридизации. реакция. C ₁ и C ₂ все состоят из трех частей: липкого конца, «стержня» в форме двойной цепи и кольцевой части одиночной цепи, как показано на рисунке 1 (1 ). Среди них b и являются комплементарными по основанию и существуют в виде двойной цепи, называемой основанием цепи C ₁ ( C ₂ ); a — это липкая одиночная цепочка, отходящая от «стержня» цепи C ₁ , а сегмент одиночной цепи c шпильки называется кольцом C ₁ цепи; соответственно, это цепное кольцо C ₂ и липкий конец одиночной цепи, отходящий от «стержня» цепи C ₂ .Мы можем назвать T цепочкой инициации, которая представляет собой одиночную цепь ДНК, состоящую из частей и. Когда добавляется инициирующая цепочка T , сегменты и гибридизируются с липким концом a и стержнем b из C ₁ соответственно. Сегмент шпильки C ₁ открыт, и сегмент открыт в виде единой цепи, как показано на рисунке 1 (2). Сегмент, представленный C ₁ и сегмент C ₂ , имеют цепную реакцию гибридизации.Секция шпильки C ₂ открыта, и сегмент обнажен C ₂ , как показано на Рисунке 1 (3). Открытый сегмент C ₂ продолжает гибридизоваться со следующим сегментом C ₁ и открывать структуру шпильки. Он будет циркулировать и последовательно реагировать до тех пор, пока в растворе не будут исчерпаны C ₁ и C ₂ . Наконец, чередующаяся гибридизация C ₁ и C ₂ спонтанно собирала длинную нанопроволоку ДНК.Каждая цепь инициации T эквивалентна участку роста нанопроволоки ДНК. При постоянной и достаточной концентрации «топлива» C ₁ и C ₂ , чем выше концентрация инициирующей цепи T , тем короче нанопроволока и тем меньше ее молекулярная масса. .

3. Модель ДНК оригами

3.1. Состав модели

Из-за простой конструкции изображения, мы даем простую принципиальную схему зашифрованного изображения «Тиан», имеющую форму китайского иероглифа «Поле.”

На принципиальной схеме есть три линии в горизонтальном и вертикальном направлении, и каждая линия имеет два коротких пути (два коротких края), всего 12 ребер. 12 краев принципиальной схемы можно использовать для создания простого зашифрованного изображения. Принципиальная схема нанесена на основу оригами, которая состоит из нескольких молекулярных маяков и обычной шпильки, закрепленной на основе ДНК оригами. Среди них девять обычных шпилек в вершинах и пересечениях принципиальной схемы, которые закреплены на основе оригами по три в каждом ряду и всего три ряда; есть молекулярные маяки с группой флуоресценции и группой гашения на каждом краю (между двумя соседними шпильками) принципиальной схемы, всего 12, как показано на рисунке 2 (а).Мы используем короткую цепочку, чтобы сложить круглый фаг в двухмерный прямоугольник в качестве основы оригами (показано серым на рисунке). На некотором расстоянии от основы оригами вытягиваем скрепочную цепочку с липким концом (показан на рисунке голубым цветом), который связан со структурами шпильки (включая молекулярный маяк и структуру обычной шпильки). Красный — это молекулярный маяк с группой флуоресценции и гашения, а синий — это обычная шпилька.

Структура молекулярного маяка и структура шпильки в основном одинаковы. Все они состоят из пятисегментных олигонуклеотидных фрагментов, причем два сегмента дополняют друг друга, образуя «стебли» цепи. Одно является «кольцом» цепочки, а другое дополняет липкий конец цепочки для скрепления скоб, идущей на основу оригами, которая фиксирует цепочку на основе оригами. Только по сравнению с обычной структурой шпильки, два липких конца молекулярного маяка имеют люминесцентные группы флуоресценции и группы гашения.Они не загораются, когда не включены. И они включаются и светятся только тогда, когда добавляются стартовая цепочка и промежуточная вспомогательная цепочка (в совокупности именуемые здесь «цепочкой шифров»). И обычная структура шпильки играет роль руководства по маршруту, чтобы избежать предварительного открытия других соседних молекулярных маяков при открытии этих молекулярных маяков, чтобы его можно было открыть в соответствии с разработанным маршрутом. Таким образом, молекулярные маяки, закрепленные на основе оригами, можно использовать для создания простого зашифрованного изображения, а соответствующие молекулярные маяки необходимо открыть для отображения шаблона шифра.

Чтобы открыть соответствующий молекулярный маяк, необходимо добавить шифровальную цепочку, которая состоит из начальной и промежуточной цепочек, как показано на рисунке 2 (b). Начальная цепь состоит из двух олигонуклеотидных фрагментов, как показано на левой стороне рисунка 2 (b); промежуточная цепь состоит из четырех олигонуклеотидных фрагментов, как показано на правой стороне рисунка 2 (b). Только цепочка, содержащая правильный фрагмент, может открыть соответствующий молекулярный маяк, и тогда шаблон шифра может быть отображен.

3.2. Построение шифра и реализация декодирования

В соответствии с составом модели мы разработали шаблон шифра, и в соответствии с шаблоном шифра мы разработали базовую последовательность структуры шпильки (включая структуру молекулярного маяка и шпильки) на основе оригами. . Базовая последовательность каждой структуры шпильки, проходящей через узор, почти одинакова. Она отличается только от последовательности оснований молекулярного маяка и структуры шпильки на маркере связывания и от последовательности оснований структуры шпильки начальной точки на стыке начальной цепи, как показано на рисунке 3 (а).Мы устанавливаем верхний левый угол в качестве начальной точки шаблона шифра, а разработанный шаблон шифра представляет собой пунктирную коричневую линию на графике ниже. Базовая последовательность структуры шпильки в других положениях отличается от нее, поэтому она не будет реагировать с ней и открывать ее.

В шаблоне шифра на этой подложке оригами все шпильки можно рассматривать как состоящие из пяти сегментов олигонуклеотидных фрагментов. Один из сегментов является дополнительным к липкому концу скрепочной цепочки, идущей на основе оригами, и не отмечен буквами.Остальные четыре сегмента помечены буквами, как показано в структуре шпильки на Рисунке 3 (а). Сегменты и и являются стержнями шпилечной структуры и дополняют друг друга; сегмент c — петля шпилечной конструкции. Вышеуказанные фрагменты олигонуклеотидов одинаковы во всех структурах шпильки. Только по сравнению с обычной структурой шпильки, два липких конца и и сегменты молекулярного маяка имеют люминесцентные флуоресцентные группы и группы гашения.Структура шпильки начальной точки отличается от других структур шпильки в олигонуклеотидном фрагменте, объединенном с исходной цепью, и мы отмечаем ее как сегмент x . Остальные шпильки этого сегмента мы обозначаем как сегмент e .

Базовая последовательность структуры шпильки в позиции шаблона без шифрования отличается от последовательности в позиции шаблона шифра, так что цепочка шифрования не будет реагировать с ней, и эта структура шпильки не будет открыта.Чтобы упростить проектирование структуры шпильки, мы можем спроектировать только другую структуру шпильки, не имеющую шифрованного рисунка, рядом со структурой шпильки в месте расположения зашифрованного рисунка, чтобы избежать участия других структур шпильки в реакции.

Разработанную основу для оригами мы заложили в решение заранее. Затем мы добавляем в раствор цепочку шифров. Шпильчатая структура начальной точки имеет специальный олигонуклеотидный фрагмент, который можно специфически комбинировать с начальной цепочкой в ​​зашифрованной цепи, тем самым обеспечивая уникальность начальной точки.

Когда к раствору добавляется цепочка шифров, начальная цепочка откроет шпилечную структуру начальной точки. Процесс открытия показан на рисунке 3 (b). Сегмент начальной цепи будет дополнять и соединяться с сегментом x структуры шпильки начальной точки, а сегмент начальной цепи дополняет и соединяется с сегментом a структуры шпильки начальной точки, тем самым открывая шпилька. Сегмент шпильки c и сегмент структуры шпильки будут комплементарно спарены с сегментом промежуточной цепи и сегментом a цепи шифра, тем самым открывая промежуточную цепь.Сегмент петли и сегмент промежуточной цепи могут по-прежнему быть комплементарными в паре с сегментом e и сегментом молекулярного маяка, тем самым открывая молекулярный маяк и заставляя узор светиться.

Другой молекулярный маяк, примыкающий к структуре шпильки начальной точки, не откроется (то есть шаблон шифра не пройдет), потому что его структура базовой последовательности отличается от промежуточной цепи. Таким образом, согласно разработанному шаблону шифра, структура шпильки может быть открыта последовательно; стартовая цепочка может раскрыть шпилечную структуру стартовой точки; шпилька раскрывает промежуточную цепочку; промежуточная цепь открывает молекулярный маяк; загорается молекулярный маяк; а затем молекулярный маяк открывает промежуточную цепочку, чтобы, наконец, отобразить шаблон шифра, как показано на рисунке 3 (c).В то же время промежуточная цепь может открывать только соседнюю шпилечную структуру предыдущей, что позволяет избежать несовпадений.

Принципиальная схема разработанного нами шаблона шифра не упорядочивает молекулярные маяки напрямую. Добавление обычных шпилечных структур между молекулярными маяками может избежать ситуации, когда на пути шаблона шифра имеется загиб, а последовательность открытия не может следовать за дизайнерским изображением. Как показано на Рисунке 4 (a), T ₁ проходит через T ₂ до T ₃ вместо прямого от T ₁ до T ₃ .Правильный и неправильный способы открытия показаны на Рисунке 4 (б).

Заливаем в раствор цепочку шифров. Если цепочка шифров верна, начальная цепочка может открыть структуру шпильки в начальной точке, а затем промежуточная цепочка цепочки шифров может последовательно открыть структуру шпильки, через которую проходит шаблон шифра. И открытый молекулярный маяк загорится, чтобы отобразить шаблон шифра. Если шифр неправильный, независимо от того, неверна ли базовая последовательность в начальной или промежуточной цепочке, структура шпильки не может быть открыта для отображения шаблона шифра.Как показано на рисунке 4 (c), верхняя часть — это открытая фигура с правильным отображением цепочки шифров, а нижняя часть — это фигура с неправильным отображением цепочки шифров (это ошибка начальной цепочки).

Мы также рассматриваем возможность сокрытия базового кода промежуточной цепочки, и правильным кодом является ее пароль. Поскольку алгоритм шифрования кодирования ДНК был очень зрелым, мы скрываем базовую последовательность промежуточной цепи. Получив только его метод декодирования, завершив декодирование и найдя соответствующую промежуточную цепочку для сопоставления, мы могли получить правильный шаблон шифра, помещая цепочку шифров в решение.Если декодирование не будет успешным, мы не получим окончательный правильный образец шифра. Таким образом мы можем сделать цепочку шифров более безопасной. У нас должна быть не только цепочка шифров, но и правильный метод декодирования цепочки шифров, чтобы правильный ответ мог сформировать правильный путь. Этим мы и займемся дальше.

4. Заключение

В этой статье модель ДНК-оригами для простого декодирования изображений создается путем объединения ДНК-оригами с цепной реакцией гибридизации. На основе оригами мы разрабатываем конструкцию шпильки, которая расшифровывает простой шифр.Правильная цепочка шифров, состоящая из начальной и промежуточной цепочек, может открыть молекулярный маяк и отобразить шаблон шифра. Но шпилька — это одноразовый канал, который нельзя использовать повторно; шаблон шифра не может быть предназначен для кроссоверов. Ожидается, что с развитием молекулярной биологии и биоинженерии этот метод будет иметь больше возможностей для повторного использования и может быть расширен для решения более сложных задач декодирования.

Доступность данных

Данные, использованные для подтверждения результатов этого исследования, можно получить у соответствующего автора по запросу.

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Пять этапов развития чтения — ошибка грамотности

«Независимо от ее среды грамотности, независимо от ее методов обучения … задачи для … каждый начинающий читатель начинает с обучения расшифровке печати и пониманию значения того, что имеет был декодирован. Чтобы достичь этого, каждый ребенок должен понять принцип алфавита, на открытие которого у наших предков потребовались тысячи лет.(Вольф, стр. 116)

«Главное открытие для начинающего читателя — это … [] все более консолидированная концепция, согласно которой буквы соединяются со звуками языка». (Вольф, стр. 117)

«Следующим для нее является изучение всех правил соответствия графема-фонема при декодировании, и это включает в себя открытие одной части и тяжелую работу над многими частями. Обеим помогают три способности взламывать код: фонологическая, орфографическая и семантическая области изучения языка ». (Вольф, стр. 117)

«Постепенно они учатся слышать более мелкие фонемы в слогах и словах и управлять ими, и эта способность является одним из лучших предикторов успеха ребенка в обучении чтению.(Wolf, pp117)

«Полезный метод помощи начинающим читателям с пониманием фонем и их смешиванием включает в себя« фонологическую запись ». Это может показаться претенциозным термином для чтения вслух, но« чтение вслух »было бы слишком простым термин, обозначающий то, что на самом деле представляет собой динамический процесс, состоящий из двух частей. Чтение вслух подчеркивает для детей взаимосвязь между их устным и письменным языком. Он предлагает начинающим читателям их собственную форму самообучения ». (Вольф, стр. 118)

«Чтение вслух также раскрывает для учителя и любого слушателя стратегии и общие ошибки, типичные для конкретного ребенка.(Вольф, стр. 119)

«Во всех сферах обучения — от езды на велосипеде до понимания концепции смерти — дети развиваются на основе континуума знаний, переходя от частичной концепции к устоявшейся концепции». (Вольф, стр 116)

Орфография

«Орфографическое развитие состоит из изучения всех этих визуальных условностей для изображения определенного языка, с его репертуаром общих буквенных узоров и, казалось бы, нерегулярных употреблений… Дети учат орфографические условные обозначения, шаг за шагом ». (Вольф, стр 120)

«Как бы это ни называли, развитие орфографии для начинающих читателей требует многократных экспозиций для печати — практикуйтесь под любым другим именем». (Wolf, pp. 120–121)

«Явное изучение общепринятых гласных, морфемных единиц и разнообразных орфографических моделей в английском языке (например, колючие группы согласных, которые предшествуют многим словам) помогает работе зрительной системы». (Вольф, стр. 121)

Семантика (словарь)

«Для некоторых детей знание значения слова подталкивает их прерывистое декодирование к реальности.(Вольф, стр. 122)

«Для тысяч начинающих читателей, занимающихся взломом кода … семантическое развитие играет гораздо большую роль, чем признают многие защитники фонетики, но гораздо меньшую, чем предполагают сторонники целостного языка». (Вольф, стр. 122)

«Если значение плохо расшифрованного слова ребенка легко доступно, его или ее высказывание имеет больше шансов быть распознанным как слово, а также запомнено и сохранено». (Вольф, стр. 123)

«Явное обучение лексике в классе решает некоторые проблемы, но начинающим читателям необходимо знать гораздо больше, чем поверхностное значение слова, даже для своих простых историй.Они также должны обладать знаниями и гибкостью в отношении разнообразных употреблений и функций слова в разных контекстах ». (Wolf, pp 124)

(см. «Этапы развития грамотности для дальнейшего обсуждения».)

Окситоцин модулирует хемосенсорное декодирование пола человека в зависимости от дозы

Все рецензенты сочли работу интересной, фундаментальной и новаторской. Гормоны (OXT, VAS), гендерное восприятие при ходьбе с точечным светом и химиочувствительность пересекаются в этом исследовании, что делает его по своей сути сложной и несколько сложной задачей для читателя.Первый пункт исправления состоит в том, чтобы уточнить результаты и немного поработать над ними, а также объяснить некоторые ожидания, которые не были очевидны для рецензентов и вряд ли будут очевидны для обычного читателя.

Мы разъяснили обоснование, гипотезы и результаты экспериментов в исправленной рукописи. См. Также наши ответы на пункты 1 и 2 рецензента 1, пункты 2 и 8 рецензента 3 и пункты 1–3 рецензента 4 ниже.

Рецензент № 1:

Это новаторское исследование изучает роль oxt и vas в восприятии пола с использованием точечной световой ходьбы и вводимых женских и мужских запахов.Это сложное исследование, за которым сложно следить, но оно заложено в дизайне, и авторы хорошо справляются со своей задачей. Я нашел данные убедительными, а интерпретации интересными.

Благодарим рецензента за положительную оценку нашей работы.

1) На рисунках 2E, J и 3 графики должны показывать некоторую метрику данных, а не сдвиг, чтобы можно было проиллюстрировать состояние отсутствия наркотиков и его изменчивость.

Сдвиги PSE на рисунках 2E, J и 3 относятся к их соответствующим контрольным условиям (только раствор-носитель из гвоздичного масла).Теперь мы включили новый рисунок в исправленную рукопись (рисунок 3 — рисунок в приложении 1), который иллюстрирует основные тенденции PSE при каждой комбинации обонятельных (андростадиенон, эстратетраенол, контроль носителя) и условий приема лекарств (60 мкг атозибана, 24 МЕ окситоцина, 24 МЕ вазопрессина). Мы отмечаем, что PSE под воздействием одного раствора-носителя были сопоставимы для разных видов лекарственного лечения и между гетеросексуальными и гомосексуальными мужчинами (лечение лекарствами: F _{2, 138} = 0.092, p = 0,91; сексуальная ориентация: F _{1, 138} = 0,011, p = 0,92; взаимодействие: F _{2, 138} = 0,22, p = 0,80).

2) Подраздел «Окситоцин, вазопрессин и подсознательная хемосенсорная расшифровка пола у гетеросексуальных и гомосексуальных мужчин» «следует, что люди с разным уровнем эндогенного окситоцина будут различаться по своей восприимчивости к таким хемосигналам, а также к эффекту экзогенного окситоцина». Почему это следует?

Мы изменили предложение на «Если окситоцин играет роль в переработке эстратетраенола (у гетеросексуальных мужчин) и андростадиенона (у гомосексуальных мужчин), учитывая гетерогенное влияние окситоцина на людей с разным уровнем социальной активности» (Bartzvet al., 2011), в частности, согласно оценке AQ (Bartz et al., 2019; Bartz et al., 2010), следует, что люди с разными показателями AQ могут различаться по своей восприимчивости к таким хемосигналам, а также к воздействию экзогенных окситоцин »в подразделе« Окситоцин, вазопрессин и подсознательная хемосенсорная расшифровка пола у гетеросексуальных и гомосексуальных мужчин »переработанной рукописи. Также ознакомьтесь с нашим ответом ниже на связанный вопрос, поднятый рецензентом 3 (пункт 2 рецензента 3).

Рецензент № 2:

В целом, это очень впечатляющее исследование, логически построенное на серии из 5 экспериментов, убедительное доказательство раскрытия нейроэндокринных механизмов, участвующих в хемосенсорной коммуникации секса, и демонстрации того, что окситоцин и вазопрессин играют разные роли в этом процессе.

Мы ценим положительные замечания рецензента.

Несколько тривиальных наблюдений:

1) Я был бы признателен за информацию о том, какие критерии они использовали — если таковые имеются — для определения размеров выборки.

По сути, для каждого лекарственного состояния мы исследовали, был ли значительный эффект андростадиенона или эстратетраенола в подгруппе из 24 участников. Размеры образцов (n = 24 в каждой подгруппе) были определены G * Power как достаточные для выявления умеренного эффекта андростадиенона или эстратетраенола (d ≈ 0.6) при мощности 80%. Величина эффекта была оценена на основе более раннего исследования, в котором использовались почти те же стимулы и процедуры психофизического тестирования, что и в текущем исследовании (Zhou et al., 2014). Это разъясняется в разделе «Материалы и методы» отредактированной рукописи. См. Также наш ответ ниже на связанный вопрос, поднятый рецензентом 3 (пункт 1 рецензента 3).

2) Было бы полезно, если бы авторы спорили, почему они не использовали участников из гетеросексуальных и лесбиянок?

На действие окситоцина у женщин может влиять менструальная фаза (колебания гонадных стероидов) и использование гормональных контрацептивов (Insel et al., 1993; Scheele et al., 2016). Окситоцин также вызывает сокращение матки, что может быть особенно проблематичным для женщин на ранних сроках беременности. Таким образом, прагматически сложно исследовать влияние окситоцина на женщин. Теперь они разъяснены в разделе «Материалы и методы» отредактированной рукописи.

Рецензент № 3:

В этом исследовании авторы исследовали биологический субстрат (субстраты) хемосенсорного декодирования женственности, уделяя особое внимание системам окситоцина и, тесно связанным с ними, вазопрессину, исходя из их роли в репродуктивном и социальном поведении.Результаты показали, что окситоцин, но не вазопрессин, играет причинную роль в хемосенсорной коммуникации у людей. Документ был хорошо написан, и мне особенно понравилось, как они использовали агонист И антагонист окситоцина для подтверждения своих утверждений, а также вазопрессин для подтверждения дискриминантной достоверности. Эта работа вносит важный вклад в наше понимание биологических механизмов, поддерживающих обработку социальной информации человека.

Благодарим рецензента за положительную оценку нашей работы и конструктивные предложения.

1) Мое первое беспокойство связано с размером выборки, который кажется небольшим. Тем не менее, я действительно понимаю, насколько сложно проводить такого рода исследования по применению лекарств, а также тот факт, что авторы провели несколько исследований и сообщили о последовательных эффектах в разных исследованиях, поэтому я разорван. Возможно, авторы могли бы предоставить дополнительную информацию о статистической мощности. Авторы обращаются к статистической мощности (подраздел «Участники»):

«… Размеры образцов (n = 24 в каждой подгруппе) были определены G * Power как достаточные для выявления умеренного эффекта андростадиенона или эстратетраенола (d ≈ 0.6) при мощности 80%. Величина эффекта была оценена на основе более раннего исследования, в котором использовались почти те же стимулы и процедуры психофизического тестирования, что и в текущем исследовании (Zhou et al., 2014) ».

Тем не менее, похоже, что они сообщают только о способности обнаруживать влияние андростадиенона и эстратетраенола на химиосенсорную коммуникацию, а НЕ об умерении лекарствами или об умеренности индивидуальными различиями (AQ, сексуальная ориентация). Не могли бы авторы рассказать об этих проблемах? Специально для исследования 3, где, по-видимому, было 10 состояний (12 МЕ ОТ, 24 МЕ ОТ, 12 МЕ АВП, 24 МЕ АВП, PL x эстратетраенол vs.перевозчик).

Поскольку нам не было известно ни о каком предыдущем исследовании, в котором изучалась модуляция хемосенсорного декодирования пола окситоцином / вазопрессином или индивидуальными различиями, было невозможно оценить априори величину эффекта их взаимодействия. Таким образом, наше исследование было направлено на выявление эффекта андростадиенона или эстратетраенола в каждой подгруппе участников (n = 24) при различных лекарственных препаратах. Иными словами, для каждого лекарственного состояния мы исследовали, был ли значительный эффект андростадиенона или эстратетраенола в подгруппе из 24 участников.Теперь это разъясняется в разделе «Материалы и методы» отредактированной рукописи.

В экспериментах 1 и 2 медикаментозное лечение служило фактором между субъектами, наш анализ взаимодействий между обонятельным состоянием, лекарственным лечением и сексуальной ориентацией (рис. 2 и рис. 3) был основан на данных, полученных от 144 участников. и 432 сеанса тестирования. В экспериментах 3-5 медикаментозное лечение служило фактором внутри субъектов, наш анализ взаимодействий между обонятельным состоянием, медикаментозным лечением и социальным профессионализмом (рисунок 4 и рисунок 5) был основан на данных, полученных от 72 участников и 624 сеанса тестирования.Мы хотели бы отметить, что размеры нашей выборки сопоставимы, если не больше, с теми, которые использовались в некоторых более ранних исследованиях, в которых рассматривались взаимосвязи между лекарственными средствами и индивидуальными различиями (например, (Bartz et al., 2019; Bartz et al., 2010; Feeser et al., 2015; Scheele et al., 2014; Spengler et al., 2017)).

2) Мое второе беспокойство связано с утверждением автора, что менее социально опытные люди имеют более низкий уровень эндогенного, и причина, по которой окситоцин должен быть полезен для них, ПОТОМУ ЧТО у них более низкий уровень окситоцина.Например, как пишут авторы:

Резюме: «… и в зависимости от социальной компетентности реципиента — частичное проявление их уровня эндогенного окситоцина».

Раздел обсуждения: «… таким образом, что эффект дозы экзогенного окситоцина зависел от социальных навыков реципиента, что, в свою очередь, частично отражало его уровень эндогенного окситоцина (Parker et al., 2014)».

Раздел для обсуждения: «Более того, они предоставляют убедительные поведенческие доказательства немонотонного эффекта интраназального окситоцина, который взаимодействует с социальными навыками реципиента или уровнем эндогенного окситоцина.«

Последнее утверждение особенно проблематично, учитывая, что авторы на самом деле не измеряли эндогенный ОТ участников, но это утверждение заставляет думать, что они это сделали.

Хотя есть доказательства связи эндогенных уровней ОТ с социальным профессионализмом, насколько мне известно, никто не продемонстрировал, что экзогенный ОТ выборочно приносит пользу менее социально опытным людям, потому что он изменяет эндогенные уровни ОТ. Учитывая это, авторы могут захотеть пересмотреть свое обоснование экспериментов 3 и 4.На самом деле, существует множество эмпирических доказательств избирательного положительного воздействия окситоцина на людей, которые менее социально подготовлены (например, Luminet et al., 2011; Radke and de Bruijn; 2015; Feeser et al., 2015), в частности, согласно оценкам. от AQ (Bartz et al., 2010; 2019). Я думаю, что ссылка на это исследование является достаточным основанием для того, чтобы рассматривать AQ как модератора в экспериментах 3 и 4. Конечно, авторы могут упомянуть эндогенные результаты ОТ-РАС; Я просто не стал бы делать явных заявлений о механизме, поскольку кажется, что они (без необходимости) выходят из строя.

Мы полностью согласны и хотели бы поблагодарить рецензента за направление нас к этим исследованиям. Мы внесли изменения в текст в аннотации и в разделе «Обсуждение» исправленной рукописи, чтобы сделать наши выражения более строгими. Некоторые из упомянутых исследований также цитируются в переработанной рукописи.

Рецензент № 4:

Это исследование направлено на проверку того, может ли интраназальное введение нейропептидов окситоцина (OXT) и вазопрессина (AVP) опосредовать действие двух предполагаемых человеческих хемосигналов — андроста-4,16, -диен-33-она (AND) и эстра-1. , 3,5 (10), 16-тетраен-3-ол (EST).Чтобы проверить эту гипотезу, авторы использовали поведенческую задачу под названием PLW, в которой участники определяют пол (женский или мужской) точечной фигуры. В рукописи они подробно описали 5 экспериментов, которые подтверждают связь между OXT и эффектом EST.

В целом, рукопись является новой и представляет собой важный вклад, однако есть несколько моментов, на которые следует обратить внимание:

Благодарим рецензента за общую положительную оценку нашей работы, а также за подробные комментарии и предложения.

Существенные изменения:

1) За рукописью трудно следить. Хотя он разделен на серии экспериментов по каждому фокусу тестирования, трудно проследить линию мысли, которая ведет к каждому эксперименту, какова была выдвинутая гипотеза и как они хотели ее проверить.

Обоснование и гипотезы для экспериментов 1-2, 3, 4 и 5 теперь соответственно изложены в разделе результатов исправленной рукописи. Также ознакомьтесь с нашими ответами выше на два связанных вопроса, поднятых рецензентом 3 (пункты 2 и 8).

2) В основных экспериментах (1-5) использовался статистический метод парного t-критерия. Данные такого рода должны быть статистически проверены с использованием одного статистического теста (например, ANOVA вместо нескольких t-критериев) с факторами запаха и участника.

Результаты ANOVA теперь представлены в подразделе «Окситоцин, вазопрессин и подсознательное хемосенсорное декодирование пола у гетеросексуальных и гомосексуальных мужчин» (эксперименты 1 и 2) и в подразделе «Дозозависимая модуляция хемосенсорной коммуникации секса с помощью окситоцина, но не вазопрессина. у людей с высоким и низким AQ »(Эксперименты 3-5) исправленной рукописи.

3) Были ли внесены поправки на множественные сравнения? Пожалуйста, укажите это в тексте.

Как упоминалось в нашем ответе на пункт 1 рецензента 3, наше исследование было разработано, чтобы изучить, был ли значительный эффект андростадиенона или эстратетраенола в каждой подгруппе участников при каждом лекарственном состоянии. Сравнения между андростадиеноном / эстратетраенолом и контрольной группой носителей были запланированы (см. Также наш ответ на пункт 1 этого рецензента) и, следовательно, не требовали исправлений для множественных сравнений.Более того, сообщаемые эффекты в каждом эксперименте остались бы статистически значимыми, если бы мы применили поправку Бонферрони.

4) Неясно, все ли эксперименты были двойными слепыми. Не знали ли и экспериментатор, и испытуемый о лекарствах и запахах, используемых во всех экспериментах? Если нет, это следует четко признать.

Как упоминалось в разделе «Материалы и методы» оригинальной рукописи, как запахи, так и лекарственные растворы были закодированы человеком, не участвовавшим в исследовании.Все эксперименты были двойными слепыми. В условиях «без лекарств» в экспериментах 3 и 5, когда и экспериментатор, и участники знали, что лекарство не вводилось, они все еще были слепы к идентичности обонятельных стимулов.

5) В соответствии с чем авторы выбрали пороговое значение 25 баллов для AQ? В приведенной ими справке нет поддержки для этого порогового значения, и в предыдущем исследовании той же группы (eLife 2018) они выбрали пороговое значение, равное 20. Это следует уточнить.

На групповом уровне окситоцин 24 МЕ освободил гетеросексуальных мужчин в Эксперименте 1 от влияния эстратетраенола, а гомосексуальных мужчин в Эксперименте 2 — от влияния андростадиенона. Учитывая, что окситоцин оказывает более выраженное и, как правило, положительное влияние на социально менее опытных людей, согласно оценке AQ (Bartz et al., 2019; Bartz et al., 2010; Bartz et al., 2011), мы приняли относительно строгий критерий для лиц с высоким AQ — баллы AQ ≥ 25, т.е.е. На 1 стандартное отклонение или более выше сообщенного среднего значения для мужчин (Baron-Cohen et al., 2001) — в нашем дополнительном анализе данных экспериментов 1 и 2 и экспериментов 3 и 4 в надежде лучше уловить влияние социальных навыков и навыков. окситоцин в хемосенсорной коммуникации секса. Теперь это разъясняется в подразделе «Окситоцин, вазопрессин и подсознательная хемосенсорная расшифровка пола у гетеросексуальных и гомосексуальных мужчин» исправленной рукописи.

Мы также повторно проанализировали данные экспериментов 3-5, используя 20 в качестве порогового значения AQ, и получили результаты, аналогичные представленным в рукописи.

6) Что касается обонятельных стимулов, в разделе «Материалы и методы» упоминается: «Участников проинструктировали держать банку недоминантной рукой, располагать насадки для носа внутри ноздрей и непрерывно вдыхать через нос и выдыхать через них. рот на протяжении каждого блока экспериментов ». Проверяли ли авторы, используя измерения дыхания (например, спирометр), действительно ли участники вдыхали через нос и выдыхали через рот? В противном случае это может внести разнообразие в результаты, и это следует упомянуть.

Мы проверили, что участники вдыхали через нос и выдыхали через рот, наблюдая за поверхностью жидкости в банке с запахом через камеру. Как упоминалось в нашем ответе на пункт 7 рецензента 3, порядок обонятельных состояний у всех участников был сбалансирован, а порядок условий приема лекарств был рандомизирован между участниками. Процедура контролировала влияние мешающих переменных.

7) В разделе результатов он упоминается как «Три обонятельных стимула были неразличимы в восприятии по оценке в отдельной группе из 48 участников мужского пола (средняя точность треугольной дискриминации = 0.33 против вероятности = 0,33, t47 = 0,02, p> 0,9) ». Однако в разделе о методах упоминается:« Эффективность раствора-носителя гвоздичного масла в качестве маскатора запаха андростадиенона и эстратетраенола была предварительно проверена в независимая группа из 48 здоровых некурящих мужчин (22,71 {плюс минус} 2,37 года; треугольный тест, средняя точность {плюс минус} SD = 0,33 {плюс минус} 0,15 против вероятности = 0,33, p> 0,99)….… Поскольку психологический эффекты андростадиенона не связаны с чувствительностью человека к его запаху (Lundström et al., 2003), а эстратетраенол обычно считается без запаха (Lundstrom, Hummel and Olsson, 2003), мы не оценивали индивидуальную чувствительность к андростадиенону или эстратетраенолу ». Неясно, действительно ли авторы тестировали или как они тестировали , могут ли участники различать или воспринимать запах этих запахов, и было ли это проверено отдельно для каждого запахового стимула? Есть доказательства, что И у И есть запах [Keller et al., 2007], и он может восприниматься участниками как неприятный.Если есть различия в восприятии, это может повлиять на интерпретацию результатов.

Мы проверили эффективность раствора-носителя гвоздичного масла (1% об. / Об. Раствор пропиленгликоля гвоздичного масла) в качестве маскатора запахов андростадиенона (500 мкМ) и эстратетраенола (500 мкМ) в независимой группе из 48 здоровых некурящих мужчин. В частности, мы проверили, могут ли они различать андростадиенон в растворе-носителе из гвоздичного масла, эстратетраенол в растворе-носителе из гвоздичного масла и только раствор-носитель из гвоздичного масла, используя стандартный треугольный тест (6 испытаний на участника).Подробные процедуры тестирования описаны в других источниках (Ye et al., 2019; Zhou et al., 2014). Вкратце, в каждом испытании участникам с завязанными глазами были представлены три запаха, два идентичных (сравнение) и один другой (цель), и они сообщили, какой из них был лишним. Каждый запах служил для сравнения в 1/3 испытаний и целью в 1/3 испытаний. Результаты показали, что три обонятельных стимула были неразличимы для восприятия, средняя точность = 0,33 против вероятности = 0.33, p> 0,9, что согласуется с более ранними сообщениями (Ye et al., 2019; Zhou et al., 2014). Иными словами, запах андростадиенона или эстратетраенола (если он есть) эффективно маскировался гвоздичным маслом. Мы не оценивали индивидуальные пороговые значения андростадиенона или эстратетраенола без маски запаха.

Теперь они разъяснены в разделе «Материалы и методы» отредактированной рукописи.

8) На протяжении всей рукописи авторы ссылаются на «социальную компетентность» и базальные уровни OXT участников без измерения их базальных уровней OXT.Эта проблема имеет дальнейшие последствия из-за их заявления о том, что OXT влияет на реакцию на EST, однако это утверждение становится круговым, когда базальные уровни не измеряются и не принимаются во внимание при заключении о влиянии OXT.

Этот момент связан с пунктом 2 рецензента 3. См. Наш ответ на этот вопрос выше. Мы также хотели бы отметить, что в нескольких исследованиях была обнаружена связь между социальным профессионализмом и уровнем эндогенного окситоцина (Koven, Max, 2014; Lancaster et al., 2015; Parker et al., 2014).

9) Пожалуйста, перефразируйте предложение, в котором вы предполагаете, что использование гомосексуальных мужчин заменяет женщин. Раздел обсуждения

Мы удалили это предложение из исправленной рукописи.

[Примечание редакции: до принятия были предложены дальнейшие исправления, как описано ниже.]

Рецензент № 1:

Это исследование остается довольно сложным, и, к сожалению, ошибки в ссылках на рисунки не помогают читателю расшифровать эту версию.

Я хотел бы, чтобы ошибки были исправлены, чтобы можно было иметь четкое чтение. Критические ошибки заключаются в ссылке на рисунок 2, который, хотя и является одним из пяти цифр, является основополагающим для истории. Запутать читателя при установлении базовой парадигмы проблематично.

1) Во-первых, может показаться, что метки мужчин и женщин внизу рисунка 2F поменялись местами. Если их нет, то я сбит с толку. Я легко смотрел на это 5-10 раз, и с этими ярлыками цифра не вычисляется.

По оси абсцисс на рисунках 2A-D и F-I, 4A-E и G-K, а также на рисунке 4 — дополнение к рисунку 1A-C представлен физический пол ЛЖВ. Как упоминалось во Введении и в разделе «Материалы и методы» исходного основного текста, пол ЛЖВ был проиндексирован с помощью нормализованного Z-балла по оси, которая дифференцировала между фактическими ходячими мужчинами и женщинами с точки зрения линейного классификатора, и варьировалась от -0,45 ( женское) до 0,45 (мужское). В целом, чем более мужественным был ЛЖС, тем больше вероятность, что он был оценен как «мужской» (большее значение на оси Y, которое представляет долю «мужских» ответов).На этих рисунках в исправленной рукописи мы четко обозначили ось абсцисс.

Мы понимаем, что физический пол PLW и символы мужского и женского пола, представленные на исходных рисунках 2E и J, 3, 3 — добавление к рисунку 1, рисунки 4F и L, рисунок 4 — приложение к рисунку 1D и рисунок 5A, сбивают с толку. Символы мужского и женского пола предназначались для обозначения мужского предубеждения (предвзятого отношения к восприятию ЛЖС как более мужских, т.д., положительный сдвиг PSE) в гендерном восприятии участников, соответственно. С тех пор мы удалили мужские и женские символы со всех фигур. Кроме того, мы прояснили и проиллюстрировали взаимосвязь между физическим полом ЛЖВ, долей «мужских» ответов, PSE и сдвигом PSE в разделе «Результаты» исправленного основного текста и на исправленных рисунках 1B и C

2) Раздел результатов:

Рисунок 2B должен быть 2F? Должны быть рисунки 2B, G, E, J; Должен быть рисунок 2D, я не G, я

Приносим извинения за ошибки.Мы пробовали разные способы организовать и представить результаты экспериментов 1 и 2 и в этом процессе ошибочно ссылались на неправильные части текста. В соответствии с предложениями рецензента 3 (пункты 1d и 2 рецензента 3) мы реорганизовали эту часть раздела «Результаты» и убедились, что в тексте есть ссылки на правильные цифры.

3 Зачем делать акцент на VAS, а не на OXT?

Как упоминалось в оригинальной рукописи, мы решили изучить, различались ли участники с высоким и низким AQ в экспериментах 1 и 2 по своей восприимчивости к хемосигналам.Поскольку значительного эффекта андростадиенона или эстратетраенола не наблюдалось при условии 24 МЕ окситоцина или 60 мкг атозибана, мы сосредоточились на состоянии 24 МЕ вазопрессина, при котором эффекты андростадиенона и эстратетраенола были сопоставимы с эффектами, полученными ранее без лекарственного лечения (Zhou et al. ., 2014). Теперь это разъясняется в разделе «Результаты» исправленного основного текста.

Рецензент № 3:

В целом, я считаю, что авторы отлично поработали, отвечая на комментарии, вопросы и предложения рецензентов.У меня осталось всего несколько вещей:

1) Ясность в отношении участников и экспериментов:

Я поднимал этот вопрос раньше — и я ценю изменения, внесенные авторами, — но я по-прежнему считаю, что они должны быть более прозрачными в отношении участников / исследований / экспериментов и сессий:

1a) «Психофизические данные, собранные у 216 гетеросексуальных и гомосексуальных мужчин в течение 1056 сеансов, последовательно показали, что такая хемосенсорная коммуникация секса блокируется конкурентным антагонистом рецепторов окситоцина и вазопрессина, называемым атозибаном, вводимым назально»

Это все еще не совсем прозрачно, поскольку размер выборки уменьшается в 5 экспериментах, что создает впечатление большей статистической мощности, чем это требуется (для каждого эксперимента / теста).Пожалуйста, укажите здесь размер выборки для каждого отдельного эксперимента или, по крайней мере, укажите, что 216 пс включают 5 экспериментов.

Аннотация имеет ограничение по количеству слов в 150 слов. В обновленном аннотации мы заявили, что психофизические данные были собраны у 216 гетеросексуальных и гомосексуальных мужчин в 5 экспериментах.

1b) «Систематические сравнения этих психометрических кривых по 5 экспериментам, всего 1056 сеансов позволили…»

Как указано выше, укажите здесь количество ps для прозрачности

Мы включили размер выборки для каждого эксперимента во Вступление к измененному основному тексту.

1c) Также меня сбивает с толку термин «сеансы». Может быть, это соглашение, характерное для их области исследований, но для меня «сеансы» предполагают сеансы тестирования, тогда как кажется, что авторы имеют в виду испытания задачи?

«Сессии» означает сеансы тестирования. Мы сделали это явным образом в отредактированной рукописи. В частности, как упоминалось в исходной рукописи, каждый участник тестировался в течение нескольких дней (3 дня в экспериментах 1 и 2, 10 дней в экспериментах 3 и 5, 6 дней в эксперименте 4) и выполнял 1 сеанс тестирования в день.Каждый сеанс состоял из 12 блоков (5 базовых блоков и 7 экспериментальных блоков), и каждый блок состоял из 70 испытаний. Результаты, представленные в нашей рукописи, основаны на данных, собранных в общей сложности 1056 сеансов тестирования или 1056 человеко-дней, что составляет 887 040 испытаний.

1d) Я думаю, что рецензент 4 сделал аналогичный комментарий, но я также обнаружил, что общий дизайн неясен:

1d-i) Идентичны ли эксперименты 1 и 2, если в эксперименте 1 участвуют гетеросексуальные мужчины, а в эксперименте 2 — гомосексуальные мужчины? Если да, то почему они называются двумя разными экспериментами, поскольку результаты обсуждаются бок о бок и, по сути, авторы все равно комбинируют данные с комплексным ANOVA?

Эксперимент 2 был проведен после того, как мы проанализировали результаты эксперимента 1, который представил сложную картину.Противодействие рецепторам окситоцина и вазопрессина атозибаном устраняет известный эффект эстратетраенола на гетеросексуальных мужчин (т. Е. Склоняет их к восприятию ЛЖВ как более женственных), но окситоцин 24 МЕ, похоже, дает тот же эффект. С другой стороны, введение 24 МЕ вазопрессина существенно не повлияло на процессинг эстратетраенола у гетеросексуальных мужчин — они по-прежнему склонялись к восприятию ЛЖВ как более женственных под воздействием эстратетраенола в той же степени, что и при отсутствии лекарственного средства. .Мы задавались вопросом, будет ли этот образец влияния лекарств справедливым для хемосенсорного декодирования мужской информации, переносимой андростадиеноном. С этой целью мы обратились к гомосексуальным мужчинам в эксперименте 2, которые, как было показано, подсознательно предвзято относятся к андростадиенону, но не к эстратетраенолу, при вынесении гендерных суждений (Zhou et al., 2014). Эксперимент 2 был идентичен Эксперименту 1, за исключением сексуальной ориентации участников. Теперь они разъяснены в разделе «Результаты» исправленного основного текста.

Мы представили результаты экспериментов 1 и 2 бок о бок в оригинальной рукописи в надежде сделать раздел более кратким, а также упростить сравнение результатов гетеросексуальных и гомосексуальных мужчин. Мы поняли, что это только усложняло объяснение причин и результатов экспериментов. Мы переписали эту часть раздела «Результаты», чтобы уточнить обоснование и результаты каждого эксперимента. Что касается использования комплексного дисперсионного анализа ANOVA для объединенных данных двух или более экспериментов, пожалуйста, обратитесь к нашему ответу ниже на пункт 1d-ii этого рецензента.

1d-ii) В более общем плане, является ли это «Исследование» с несколькими «Экспериментами», встроенными в общее Исследование? Раздел «Участники» написан таким образом (т.е. «Всего в основном исследовании приняли участие 216 молодых людей мужского пола…»), но из-за того, как Эксперименты представлены в основном тексте, у меня сложилось впечатление, что это были отдельные исследования с разными участниками. и разные дизайны, а не одно общее исследование, с экспериментом, касающимся проверки различных эффектов.

Разница между «изучением» и «экспериментом» может быть тонкой.Мы решили представить нашу работу как 1 исследование с 5 экспериментами, потому что, как упоминалось в исходной рукописи, у нас была одна единственная цель — изучить роль окситоцина и вазопрессина в хемосенсорной коммуникации секса через андростадиенон и эстратетраенол. За исключением эксперимента 1, дизайн и интерпретация каждого эксперимента руководствовались результатами предыдущих экспериментов. Объединенные результаты всех 5 экспериментов, инкапсулированные комплексным анализом ANOVA на объединенных данных экспериментов 1 и 2 и экспериментов 3-5, совместно продемонстрировали, что декодирование хемосенсорных сексуальных сигналов модулируется окситоцином вместо вазопрессина в зависимости от дозы. манера.

2) Прогнозы относительно окситоцина:

Как подробно описано ниже, я был немного удивлен некоторыми выводами, и я думаю, что авторы могли бы лучше проработать читателей. Примечание: я никоим образом не предлагаю авторам выдвигать гипотезы, которых у них не было априори, но я думаю, что им нужно проявлять больше осторожности, закладывая основу для читателей. Смотрите мои предложения ниже:

2a) «… может быть затронуто в любом направлении введением окситоцина или вазопрессина.«

Я был удивлен, что у авторов не было конкретных прогнозов относительно ОТ, учитывая, что у них были прогнозы относительно атозибана. Поскольку ОТ является агонистом, не следует ли ожидать противоположного эффекта от антагониста атозибана? Опять же, я не защищаю, чтобы авторы делали прогнозы постфактум, но я думаю, что им нужно прояснить, * почему * у них не было прогнозов на ОТ, поскольку это неочевидно (то есть, учитывая, что у них были прогнозы на атозибан).

У нас не было конкретного прогноза для окситоцина или вазопрессина, поскольку мы не знали, играют ли они одну или обе роли в обработке хемосенсорных сексуальных сигналов.Также было трудно предсказать направления их эффектов (если таковые имеются), поскольку в литературе сообщалось как о положительных, так и о отрицательных эффектах окситоцина и вазопрессина в зависимости от дозы, контекста и личных характеристик (Bartz et al., 2011; Картер, 2014; Дональдсон и Янг, 2008). Мы предсказали, что введение атозибана блокирует эффекты хемосигналов, если такие эффекты регулируются системой окситоцин / вазопрессин, поскольку атозибан является конкурентным антагонистом рецепторов окситоцина и вазопрессина.Теперь они разъясняются в разделе «Результаты» исправленного основного текста.

2b) «Обоняние эстратетраенола и андростадиенона по сравнению с одним раствором носителя не повлияло, соответственно, на критерии гендерного восприятия (индексированные PSE) гетеросексуальных и гомосексуальных мужчин, получавших атозибан (t23s = 1,37 и 0,88, ps = 0,18 и 0,39, соответственно; Рисунок 2C, D, I, J). Это, по-видимому, относится и к тем, кто получал окситоцин 24 МЕ (t23s = 0,17 и -1.29, ps = 0,87 и 0,21 соответственно; Рисунок 2E, F, I, J). «

Я был также удивлен, что окситоцин и атозибан производили одинаковый эффект, один из которых был агонистом, а другой — антагонистом. Я ценю, что авторы обращаются к этому в ходе обсуждения, и я в основном нахожу их доводы убедительными, но мне кажется, что они замалчивают это удивительное открытие здесь и в других местах (см. Ниже). Я думаю, они могли бы лучше направлять читателя, НЕ замалчивая этот момент.Например, что-то вроде «Интересно, что это, по-видимому, относится и к тем, кто лечился окситоцином 24 МЕ (t23s = 0,17 и -1,29, ps = 0,87 и 0,21, соответственно; рис. 2E, F, I, J)».

Предложение принято. Мы сделали это в разделе «Результаты» исправленного основного текста. См. Также наш ответ на пункт 1d-i этого рецензента.

2c) У меня похожие проблемы со следующими утверждениями:

«… подчинялись аналогичным нейроэндокринным механизмам, которые были нарушены интраназальным атозибаном, конкурентным антагонистом рецепторов окситоцина и вазопрессина, и на которые не влиял интраназальный вазопрессин.«

Разве окситоцин не оказывает такого же эффекта, как атозибан? Но об окситоцине не упоминается.

«Остался вопрос, почему введение окситоцина 24 МЕ освободило участников от влияния хемосигналов, и мы исследовали это более подробно».

Я бы предложил следующую модификацию для прозрачности: «оставался вопрос, почему введение окситоцина 24 МЕ дает тот же эффект, что и атозибан…»

Вместо того, чтобы замалчивать это удивительное открытие, я думаю, было бы более эффективным признать его прямо сейчас.

Мы соответствующим образом изменили эти предложения в подразделе «Окситоцин, вазопрессин и подсознательная хемосенсорная расшифровка пола у гетеросексуальных и гомосексуальных мужчин» измененного основного текста. Теперь предложения звучат следующим образом:

«… подпитывались аналогичными нейроэндокринными механизмами, которые были нарушены интраназальным атозибаном — конкурентным антагонистом рецепторов окситоцина и вазопрессина, а также 24 МЕ окситоцина, и на них не влиял 24 МЕ вазопрессина.Поскольку вазопрессин, по-видимому, не играл роли (паттерны реакции участников на хемосигналы при дозе вазопрессина 24 МЕ были сопоставимы с таковыми, полученными ранее без медикаментозного лечения), можно предположить, что в таких механизмах участвует окситоцин. Оставался вопрос, почему введение 24 МЕ окситоцина, такого как атозибан, освобождает участников от влияния хемосигналов, и мы исследовали его более подробно ».

См. Также наши ответы на пункты 1d-i, 2a и 2b этого рецензента.