В качестве альтернативы: Synonyms and analogies in English

Содержание

%d0%b2%20%d0%ba%d0%b0%d1%87%d0%b5%d1%81%d1%82%d0%b2%d0%b5%20%d0%b0%d0%bb%d1%8c%d1%82%d0%b5%d1%80%d0%bd%d0%b0%d1%82%d0%b8%d0%b2%d1%8b — с русского на все языки

Все языкиРусскийАнглийскийИспанский────────Айнский языкАканАлбанскийАлтайскийАрабскийАрагонскийАрмянскийАрумынскийАстурийскийАфрикаансБагобоБаскскийБашкирскийБелорусскийБолгарскийБурятскийВаллийскийВарайскийВенгерскийВепсскийВерхнелужицкийВьетнамскийГаитянскийГреческийГрузинскийГуараниГэльскийДатскийДолганскийДревнерусский языкИвритИдишИнгушскийИндонезийскийИнупиакИрландскийИсландскийИтальянскийЙорубаКазахскийКарачаевскийКаталанскийКвеньяКечуаКиргизскийКитайскийКлингонскийКомиКомиКорейскийКриКрымскотатарскийКумыкскийКурдскийКхмерскийЛатинскийЛатышскийЛингалаЛитовскийЛюксембургскийМайяМакедонскийМалайскийМаньчжурскийМаориМарийскийМикенскийМокшанскийМонгольскийНауатльНемецкийНидерландскийНогайскийНорвежскийОрокскийОсетинскийОсманскийПалиПапьяментоПенджабскийПерсидскийПольскийПортугальскийРумынский, МолдавскийСанскритСеверносаамскийСербскийСефардскийСилезскийСловацкийСловенскийСуахилиТагальскийТаджикскийТайскийТатарскийТвиТибетскийТофаларскийТувинскийТурецкийТуркменскийУдмуртскийУзбекскийУйгурскийУкраинскийУрдуУрумскийФарерскийФинскийФранцузскийХиндиХорватскийЦерковнославянский (Старославянский)ЧеркесскийЧерокиЧеченскийЧешскийЧувашскийШайенскогоШведскийШорскийШумерскийЭвенкийскийЭльзасскийЭрзянскийЭсперантоЭстонскийЮпийскийЯкутскийЯпонский

 

Все языкиРусскийАнглийскийИспанский────────АлтайскийАрабскийАрмянскийБаскскийБашкирскийБелорусскийВенгерскийВепсскийВодскийГреческийДатскийИвритИдишИжорскийИнгушскийИндонезийскийИсландскийИтальянскийКазахскийКарачаевскийКитайскийКорейскийКрымскотатарскийКумыкскийЛатинскийЛатышскийЛитовскийМарийскийМокшанскийМонгольскийНемецкийНидерландскийНорвежскийОсетинскийПерсидскийПольскийПортугальскийСловацкийСловенскийСуахилиТаджикскийТайскийТатарскийТурецкийТуркменскийУдмуртскийУзбекскийУйгурскийУкраинскийУрумскийФинскийФранцузскийЦерковнославянский (Старославянский)ЧеченскийЧешскийЧувашскийШведскийШорскийЭвенкийскийЭрзянскийЭсперантоЭстонскийЯкутскийЯпонский

Страны БРИКС создадут свой фонд в качестве альтернативы МВФ

Страны БРИКС на саммите в ЮАР принципиально договорились создать банк развития и резервный фонд. И фонд, и банк развития пока только обсуждаются, объяснили члены делегаций. Фонд пока в низкой стадии проработки, сообщил министр финансов России Антон Силуанов: обсуждение продолжится на встрече министров финансов «двадцатки» в апреле. Фонд должен стать финансовой страховочной сеткой для БРИКС, сообщает декларация саммита: он поможет при нехватке краткосрочной ликвидности.

Объем фонда может составить $100 млрд, рассказал Силуанов, бюджетные средства не понадобятся: ЦБ каждой страны будет гарантировать, что часть международных резервов может быть в форме валютного свопа направлена на поддержку платежного баланса члена БРИКС. По словам Силуанова, Китай мог бы предоставить $41 млрд, Россия, Индия и Бразилия – по $18 млрд, ЮАР – $5 млрд.

Международные резервы БРИКС огромны, с таким фондом они могли бы обойтись и без МВФ, замечает главный экономист Renaissance Capital Чарльз Робертсон. МВФ требует от получателей помощи выполнения жестких антикризисных программ, БРИКС могла бы предоставить помощь, например, Египту и ему не пришлось бы соглашаться на условия МВФ, полагает он.

МВФ приходит на помощь странам с кризисной ситуацией в экономике, получение средств от него требует длительных согласований, объясняет профессор Российской экономической школы Наталья Волчкова, а фонд БРИКС позволил бы оперативно реагировать на кризисы. Часто спасти ситуацию может сам факт существования фонда, продолжает Волчкова: зарезервированные средства могут делать игру против рынка бесполезной.

У стран БРИКС нет опыта спасения проблемных экономик, предупреждает Робертсон: чтобы подготовить выдачу кредита из средств такого фонда, нужны специалисты.

Перспективы банка развития БРИКС еще более туманны: министры финансов не смогли договориться о принципах его работы, рассказал Силуанов: непонятно, каким может быть капитал и механизм управления. Предполагалось, что капитал должен достичь $50 млрд, начать можно было бы и с $10 млрд – по $2 млрд от каждой страны. $2 млрд – деньги немаленькие, замечает Силуанов: «Нам будет очень непросто это в парламенте обсуждать, не только нам, но и другим странам». Президент России Владимир Путин настаивал, что банк должен действовать на рыночных условиях. БРИКС продолжит работать над созданием банка развития, говорится в декларации саммита. До 2015 г. инфраструктура стран БРИКС требует вложений на $4,5 трлн, посчитал президент ЮАР Джейкоб Зума.

Поручение министерствам финансов проработать вопрос по банку было дано год назад, для такого дела срок мал, заявил «Ведомостям» замминистра иностранных дел Сергей Рябков. К саммиту были поданы разрозненные предложения и несогласованные схемы, не имевшие во многих аспектах общего знаменателя, но Россия решила не блокировать пункт декларации по банку, а приняла более мягкую формулу – национальное прочтение документа, на которое и будет ссылаться, объяснил Рябков.

Непонятно, почему банк развития БРИКС должен подменять частные инвестиции, удивляется Робертсон: «Если частный сектор не считает, что подводный оптоволоконный кабель, соединяющий пять стран, – хорошая идея, то почему ее должны оплачивать налогоплательщики?» Такой банк развития – попытка получить доступ к китайским деньгам, считает он.

В работе банков развития важны косвенные эффекты, подчеркивает Волчкова: когда ЕБРР вкладывается в проекты в Восточной Европе или России, от улучшения социально-экономического положения опосредованно выигрывает и сама Европа. Страны БРИКС слишком далеко друг от друга, чтобы ощутить такие эффекты, продолжает Волчкова, сложно будет найти экономические стимулы для создания банка развития БРИКС, решение может быть скорее политическим.

Частный фонд Гернси и преимущества, доступные в качестве альтернативы частной трастовой компании

Публикация

13 декабря 2021

Справка

IN793

Отдельные лица и семьи используют различные структуры для защиты своих активов от неопределенности и нестабильности, а также для решения вопросов, связанных с планированием наследства и наследования. Очень часто защита активов сама по себе не является основным фактором создания таких структур.

Следующее поколение семьи нередко переезжает в новые страны для учебы, работы, открытия бизнеса и поселения. По мере того как семьи становятся более мобильными в международном масштабе, возрастает сложность управления семейными имениями и активами, а также трансграничного наследования и имущественного планирования.

Шаги, этапы и конструкции

Прежде чем семейное поместье достигнет размера и сложности, требующих создания специального односемейного офиса, структура может пройти несколько этапов.

Объединенная и расширенная фидуциарная поддержка

На раннем этапе несколько разрозненных семейных структур часто передаются одному фидуциарному поставщику или доверительному управляющему, с которым семья имеет хорошие существующие отношения или которого рекомендовал доверенный консультант.

Эти структуры обычно принимают форму дискреционного траста или фонда. Затем попечительскому управляющему или совету фонда можно поручить помочь с преобразованием должности в отдельный семейный офис, используя свои знания, опыт и существующие ресурсы; квалифицированный персонал, политики и процедуры. На этом этапе повышается эффективность управления и администрирования структур в рамках одного поставщика, укрепляются отношения между семьей и консультантом, что часто приводит к дополнительной экономической эффективности.

Частная трастовая компания (PTC)

В течение многих лет PTC был предпочтительным средством управления активами богатых семей, и многие варианты возникли в юрисдикциях, которые специализируются на их предоставлении, и чье законодательство и нормативные акты особенно подходят для управления частным капиталом. Одним из главных преимуществ PTC является то, что решения, касающиеся основных трастов, принимаются директорами, которые тщательно выбираются семьей и / или могут даже быть членами семьи.

Существует несколько вариантов PTC, которые могут быть ограничены акциями или гарантией и / или даже отдельными классами акций для целей голосования. Необходимо внимательно рассмотреть вопрос об уровне контроля над PTC. Слишком сильный контроль может привести к налоговым последствиям.

Наиболее распространенным решением проблемы контроля было владение акциями PTC через Целевое доверие (см. Диаграмму ниже), что создает дополнительные уровни владения и администрирования.

Хотя PTC остаются популярным специализированным решением, Гернси также может предложить более простую структуру через Private Trust Foundation (PTF).

Частный трастовый фонд (PTF)

PTF устраняет необходимость в уровнях владения, которые требуются выше PTC, и может упростить структуру и, следовательно, администрирование и стоимость (см. Диаграмму).

ПТФ, созданный под Закон о фондах (Гернси) 2012 («Закон»), должны быть единственной целью — действовать в качестве Доверительного управляющего трастов в интересах отдельного лица или семьи.

В законе четко указано, что при учреждении фонд Гернси имеет собственное юридическое лицо, независимое от правосубъектности его учредителя и любых должностных лиц фонда.

Диаграмма: классическая структура частной трастовой компании и решение Фонда Гернси

Преимущества PTF Гернси
  • PTF Гернси будет запускаться и управляться аналогично PTC, с привлечением местного лицензированного фидуциара, такого как Dixcart, но со значительным преимуществом, заключающимся в том, что в качестве бесхозного транспортного средства у него нет других владельцев или контролеров.
  • Члены семьи или другие доверенные советники также могут быть назначены в Совет PTF, который отвечает за выполнение функций Доверительного управляющего для соответствующих семейных трастов.

Управляемые службы

Управляемая поддержка со стороны фидуциарного провайдера часто является предпоследним этапом на постепенном пути к созданию полноценного автономного семейного офиса с непосредственным привлечением достаточно опытных сотрудников в выбранной юрисдикции.

Управляемая поддержка доступна от Dixcart

Управляемая поддержка, предоставляемая Dixcart, может включать выделенные обслуживаемые офисные помещения в бизнес-центре Dixcart в порту Сент-Питер, а также фидуциарную, бухгалтерскую и юридическую поддержку, если это необходимо. Фидуциарный провайдер, такой как Dixcart, также может помочь вырасти и превратить позицию в отдельный семейный офис, который в конечном итоге будет работать независимо.

Сложные семейные структуры и должности в семейных офисах все чаще обращают внимание на использование частных инвестиционных фондов (ПИФов) в рамках своих глобальных управленческих позиций. Dixcart на Гернси, как обладатель лицензии «Защитники инвесторов», имеет лицензию на предоставление услуг по учреждению фондов и текущему управлению фондами для поддержки и дальнейшего расширения существующих предложений для частных клиентов.

Дополнительная информация

Для получения дополнительной информации о структурах частного капитала и их управлении, пожалуйста, свяжитесь с Брюсом Уоттерсоном, директором Dixcart Trust Corporation Limited, Гернси: совет.гернси@dixcart.com.

Dixcart Trust Corporation Limited, Гернси: Полная фидуциарная лицензия, выданная Комиссией по финансовым услугам Гернси. Регистрационный номер компании на Гернси: 6512.

Назад к перечню

Применение диагностической карты о прохождении технического осмотра в качестве альтернативы международному сертификату технического осмотра

В связи с внесением изменений в Федеральный закон от 1 июля 2011 г.

№ 170-ФЗ «О техническом осмотре транспортных средств и о внесении изменений в отдельные законодательные акты Российской Федерации» (в редакции Федерального закона от 28 июля 2012 г. № 130-ФЗ), утверждением новой формы диагностической карты технического осмотра (постановление Правительства Российской Федерации от 29 ноября 2012 г.  №  1236), а также в соответствии с пунктом 4 Добавления 2 к Соглашению о принятии единообразных условий для периодических технических осмотров колесных транспортных средств и о взаимном признании таких осмотров (совершено в Вене 13 ноября 1997 года) по инициативе АСМАП Минтрансом России был направлен в МИД России образец новой формы диагностической карты технического осмотра, которая будет применяться российскими международными перевозчиками в качестве альтернативы  международному  сертификату технического осмотра (МСТО) наряду с талоном о прохождении государственного технического осмотра, направленным ранее, и диагностической картой старого образца.

 

На основании данного обращения МИД России через Постоянное Представительство Российской Федерации при ООН 26 декабря 2012 года препроводил Генеральному Секретарю ООН образец новой формы диагностической карты технического осмотра. В дальнейшем образец новой формы диагностической карты был направлен Постоянным представительством Российской Федерации при отделении ООН и других международных организаций в Женеве Исполнительному Секретарю Европейской Экономической комиссии ООН.

 

В настоящее время образец новой формы диагностической карты размещен на сайте ЕЭК ООН – документ от 04.03.2013 ECE/TRANS/WP.29/1074/Rev.4 (http://www.unece.org/fileadmin/DAM/trans/doc/2013/wp29other/1997agr/Ruspti-03.pdf), а  также направлен Секретариатом ЕЭК ООН письмом от 19 февраля т.г. странам-участницам Венского Соглашения 1997 года.

 

Таким образом, российскими автомобильными перевозчиками в качестве альтернативы МСТО наряду с диагностической картой нового образца могут применяться до окончания указанного в них срока действия – талон государственного технического осмотра (старого образца), талон технического осмотра (нового образца) и диагностическая карта старого образца.

 

АСМАП

В Мособлдуме предложили в качестве альтернативы пляжам создавать больше спортивных и лесных площадок

Фото: ТАСС

Если места отдыха сделают просто в лесу, подготовят специальные площадки для размещения людей, то жители будут отдыхать там не меньше, чем возле водоемов

Заместитель председателя комитета Мособлдумы по вопросам государственной власти и региональной безопасности Николай Черкасов предложил создавать больше лесных и спортивных площадок для отдыха в Подмосковье в качестве альтернативы пляжам, местам рядом с водоемами для купания. Об этом сообщает Агентство городских новостей «Москва». Об этом он заявил Агентству городских новостей «Москва».

«После открытия купального сезона некоторые жители Подмосковья не соблюдают элементарные правила безопасности, что зачастую приводит к плачевному результату. Необязательно нужно именно купаться, если места отдыха будут сделаны просто в лесу, подготовлены специальные площадки для размещения людей, окошена трава, созданы спортивные площадки, то жители будут отдыхать там не меньше, чем возле водоемов. Сегодня в муниципалитетах не хватает на это сил и средств и подобные площадки организуются в основном на коммерческой основе, но даже их сегодня не хватает. Необходимо уделить особое внимание именно элементарной организации мест отдыха», — заявил Черкасов в интервью Агентству.

При этом депутат отметил, что в Подмосковье проводится большая работа по мерам безопасности в купальный сезон. Черкасов также пояснил, что необходимо соблюдать нормативные документы по обеспечению безопасности отдыха на воде с точки зрения, прежде всего, эксплуатации маломерных судов.

«Нужна большая профилактическая работа по предупреждению распития спиртных напитков в местах отдыха и на берегах водоемов. Люди купаются в нетрезвом состоянии и это часто заканчивается плачевно», — резюмировал Николай Черкасов.

США начали разработку собственных 5G-сетей в качестве альтернативы Huawei — РБК

В проекте участвуют американские Microsoft, Dell и AT&T, а в дальнейшем могут подключиться европейские Nokia и Ericsson. Власти США намерены полностью исключить зависимость от оборудования Huawei ради нацбезопасности

Фото: John Locher / AP

Белый дом совместно с американскими технологическими компаниями приступил к созданию передового программного обеспечения для телекоммуникационных сетей 5G следующего поколения, стремясь ослабить господство китайской компании Huawei. Об этом пишет The Wall Street Journal со ссылкой на главного экономического советника президента США Ларри Кадлоу.

По его словам, в разработке участвуют такие компании, как Microsoft, Dell и AT&T. «Общая концепция заключается в том, чтобы вся американская архитектура 5G и инфраструктура выполнялись в основном американскими фирмами», — заявил он, добавив, что в проекте также могут принять участие европейские телекоммуникационные компании Nokia и Ericsson, которые широко представлены на американском рынке.

Как отмечает издание, план будет опираться на усилия ряда американских телекоммуникационных и технологических компаний по согласованию общих технических стандартов, которые позволят разработчикам программного обеспечения 5G запускать код на устройствах, поставляемых практически любым производителем оборудования. Это уменьшит, а возможно, полностью исключит зависимость от оборудования Huawei, отмечает газета.

«Власти США утверждают, что Huawei имеет прочные связи с китайскими военными, что делает использование их оборудования угрозой национальной безопасности США. Huawei это отрицает и заявляет, что работает независимо», — говорится в материале.

Врачи оценили альтернативу медицинским маскам для защиты от коронавируса — РБК

Фото: Christopher Furlong / Getty Images

Пластиковый щиток может быть использован в качестве альтернативы медицинским маскам, сообщил РБК инфекционист, доктор медицинских наук Николай Малышев.

Ранее в журнале Американской медицинской ассоциации (JAMA) со ссылкой на специалистов из Университета Айовы, были опубликованы данные о преимуществах пластикового щитка как в носке, так и с практической точки зрения. Исследования показали, что щитки достаточно эффективно сдерживают вирус. Их можно использовать многократно, очищая дезинфицирующими средствами. Также в отличие от масок щитки создают барьер с лицом, что затрудняет возможность прикосновения к лицу грязными руками.

Американские ученые оценили эффективность самодельных масок

«Сейчас довольно модно становится, удобно, особенно для тех, кто еще и очки носит обычные. Уже в Москве давно используют многие медики. Сейчас его довольно часто заправляют под капюшон (защитной одежды), и все великолепно. Хорошая альтернатива», — отметил он.

По словам Малышева, щиток необходимо очищать мыльной водой или дезинфицирующим средством. Он не исключил, что подобное защитное средство можно сделать самостоятельно. «В принципе и самим можно пользоваться, только с умом нужно», — добавил инфекционист.

Отличается ли «альтернативный» от «альтернативный»?

Для всех намерений и целей альтернатива и альтернатива являются синонимами. Оба слова относятся к середине 16 века, и оба описывают выбор помимо того, что предлагается сначала: альтернативная точка зрения; альтернативное предложение.

Комментаторы употребления часто подчеркивали, что «альтернативный» следует использовать для обозначения «происходящего или следующего за ним по очереди», а «альтернативный» — для обозначения «предлагающего или выражающего выбор». Но во многих случаях, когда речь идет о выборе, «альтернативный» вариант является жизнеспособной альтернативой.

Комментаторы, однако, часто подчеркивали различие: следует использовать альтернатива для обозначения «происходит или следует по очереди», а альтернатива означает «предложение или выражение выбора». Тем не менее, глядя на то, как используются эти слова, становится ясно, что все не так просто.

Да, использование альтернативного для обозначения «последовательного выполнения» хорошо известно:

Через недели через Уилла Франк уступила другому постоянному рецензенту газеты, великодушной, благодарной женщине по имени Леонора Мергансер…
-T.Coraghessan Boyle, Harper’s , октябрь 1987 г.

После переключения вправо в верхней части петли мы начали обходить ее против часовой стрелки. Поезда с углем настолько тяжелы, что их прокладывают по петле в чередующихся направлениях, чтобы распределить штурм по путям.
— Джон Макфи, The New Yorker , 10 октября 2005 г.

Твердые материалы, такие как металл, наносятся на наконечник, нагреваются и затем переносятся на поверхности, на которые наносится рисунок.Через чередующихся нагрева и охлаждения наконечника можно точно контролировать осаждение материала.
— Энн Айзенберг, The New York Times , 23 сентября 2004 г.

Тем не менее, «по очереди», по-видимому, было первоначальным значением и для альтернативы . Одно из первых использований встречается в стихотворении 17 века, возможно, из-за необходимости в дополнительном слоге:

.

То, что делает Счастье, по-прежнему процветает дольше всех
Где Радость и Печаль меняются Альтернатива .
— Роберт Херрик, Геспериды , 1648

Хотя мы все еще видим использование альтернативы в смысле «по очереди», большинство современных примеров можно найти в британских публикациях:

Чтобы уменьшить выбросы, автомобили с нечетными и четными номерными знаками смогут ездить только в альтернативных днях, начиная с 20 июля.

В то время как вы вряд ли увидите , альтернатива , используемая в американском английском для обозначения «успеха по очереди», , альтернатива , часто используется для обозначения «предложения или выражения выбора».«И то, и другое используется регулярно: в режиссерской версии фильма может быть альтернативный конец ; обновление дорожного движения предупреждает автомобилистов, чтобы они искали альтернативный маршрут .

Однако во многих примерах это слово используется просто для обозначения «предлагает выбор, отличный от традиционного или ожидаемого»:

Она была воспитана, чтобы знать вещи, ценить тонкое различение и могла видеть альтернативное будущее, которое все еще было возможно реализовать даже в тридцать четыре года.
– Ричард Форд, Harper’s , июнь 2012 г.

Конечно, тексты бесполезны, если они неточны. А местные поликлиники не спешат сообщать о пробелах в обслуживании. Итак, система имеет альтернативных потока данных: краудсорсинг.
– Белинда Ласкомб, Время , 27 августа 2012

Но перед лицом организованного и страстного сопротивления общественности эта поддержка рухнула. Лидеры Портленда, в том числе харизматичный молодой мэр по имени Нил Гольдшмидт, предложили альтернативный план .Перенаправьте эти деньги, по крайней мере, часть из них, на зарождающийся железнодорожный ренессанс, в частности, на 15-мильную линию легкорельсового транспорта от центра Портленда до восточного пригорода Грешама.
— Бен Уир, The Austin American-Statesman , 10 августа 2014 г.

Альтернатива реально работает во всех этих ситуациях:

Социальные сети, такие как Twitter, YouTube и Facebook, оказались полезными в качестве альтернативных источников новостей и как способ для протестующих выразить свое недовольство, в результате чего службы безопасности закрыли YouTube на два месяца и Twitter на две недели.
— Себнем Арсу, The New York Times , 4 января 2015 г.

После того, как в 19 веке морская мощь Гидры пришла в упадок, она превратилась в ловлю губок как альтернативный источник дохода.
– Лоуренс Осборн, The New York Times Style Magazine , 23 марта 2014 г.

Как и альтернатива , альтернатива имеет свои экземпляры, где она, а не альтернатива , предпочтительнее. В частности, он часто означает вариант, который можно рассматривать отдельно от основных традиций: домовладелец может искать альтернативный источник энергии, такой как солнечная энергия, а не более стандартный вариант, такой как нефть или природный газ. Альтернативная медицина стремится предложить средства, не считающиеся частью традиционной медицины. Еженедельная газета альтернатива может освещать аспекты городской культуры, упущенные из виду в ее основной газете, а музыка альтернатива была придумана для описания стилей рока, на которые повлияли другие жанры и которые обычно не транслируются на популярном радио.

В этих случаях уместно использовать альтернативу : люди будут странно смотреть на вас, если вы упомянете «альтернативную медицину», точно так же, как ваш книжный клуб с меньшей вероятностью будет собираться по «альтернативным вторникам».» Но во многих случаях, когда речь идет о выборе, альтернатива является жизнеспособной альтернативой.

Вариант, Альтернатива, Альтернатива — AMA Style Insider

Альтернативный означает «один за другим», тогда как альтернативный означает «один вместо другого» 1 — и вариант и вариант по сути одно и то же.Легко, не так ли?

Нет. По крайней мере, не совсем.

Хотя немногие авторы неправильно используют , альтернативу , вместо , альтернативу в смысле «одно за другим», существуют тонкие различия между этими словами — а также между , альтернативой и , альтернативой , — когда они используются в других значениях. Потенциальная путаница очевидна, если учесть, например, что опция была определена как «нечто, что можно выбрать» 2(p871) ; альтернатива как «одна из двух или более вещей, курсов или предложений, которые необходимо выбрать» 2(p37) ; и альтернативный как «тот, который заменяет или чередуется с другим». 2(p37) И это с учетом только употребления этих слов в качестве существительных. В качестве прилагательного альтернатива была определена как «предлагающая или выражающая выбор», а альтернатива как «составляющая альтернативу». 2(стр.37)

Итак, есть ли проход через эту чащу?

Вариант и вариант , вариант обычно считаются взаимозаменяемыми, но вариант , альтернатива , представляет собой вариант или вариант, который стоит «вместо другого». 1 Таким образом, у человека, столкнувшегося с многочисленными вариантами (выборами), всегда будет на один вариант больше, чем альтернатив . 3 (Некоторые авторитетные источники предлагают использовать альтернативу только в том случае, если доступно не более 2 вариантов. Однако немногие авторы соблюдают это различие. перечисляет 4 десерта — при условии ограничения в 1 десерт — будет иметь 4 вариантов (т. е. вариантов выбора), но только 3 альтернатив .Кроме того, обычно предполагается, что один из вариантов будет исходным или предпочтительным, а остальные альтернативами . Например, в этом десертном меню торт «Красный бархат», тирамису и крем-брюле могут быть альтернативами этому пирожному с тройной помадкой из лавы и ганаша, на который кто-то глазел, в случае, если официант вернется с печальными новостями о том, что брауни, по-видимому, также был первым выбором всех остальных.

Но все становится немного неясным, когда дело доходит до выбора между альтернативой и альтернативой .Как было сказано выше, эти слова приобрели довольно близкие значения. Когда проводится различие, кажется, что оно зависит от того, имеет ли место степень принуждения, причем альтернатива предпочтительнее, когда такого принуждения нет. Например, человек, выбранный в качестве альтернативного присяжного заседателя , не имеет большого выбора в этом вопросе; аналогичным образом, в то время как человек, планирующий поездку, вполне может наметить несколько альтернативных маршрутов , тот же человек, столкнувшийся с неожиданным закрытием дороги, вынужден выбрать альтернативный маршрут . 5 И, хотя вариант и вариант могут использоваться взаимозаменяемо, вариант вариант имеет немного больше нюансов, чем вариант вариант , предполагая «соответствие для какой-либо цели». 4 Альтернатива также может предполагать «принуждение к выбору» 4 , хотя в этом случае принуждение заключается в выборе между альтернативами (например, «Альтернативы — свобода и смерть», 4 ), а не, как в случае с альтернативным , принуждение или обязанность служить вместо другого (например, альтернативный присяжный, альтернативный бьющий).

На практике, хотя некоторые авторитеты по-прежнему выступают за сохранение традиционных различий между альтернативой и альтернативой , фактическое использование быстро меняется, и альтернатива теперь часто используется, когда требуется существительное, и альтернатива , когда прилагательное призвал к. 6 Тем не менее, большое замечание для авторов-медиков: альтернатива используется как прилагательное в медицинском контексте, когда речь идет о неаллопатической медицине, методах лечения или терапии, таких как иглоукалывание, гомеопатия и т. д.Таким образом, прилагательное альтернативный , безусловно, предпочтительнее, когда речь идет, например, о различных вариантах аллопатического лечения, доступных пациенту (например, «консультирующий врач рекомендовал операцию, но также предложил 3 альтернативных подхода»).

Итог:

● Ищете слово, обозначающее «один за другим»? 1 Используйте , альтернативный (например, «Попеременные улыбки и хмурые взгляды, оба неискренние». 7 )

● Альтернатива по определению является альтернативой чему-то другому — обычно предпочтительному выбору или исходному плану действий — поэтому всегда будет на 1 вариант больше, чем альтернатив .

● Хотя некоторые органы все еще сохраняют традиционные различия между альтернативой и альтернативой , использование быстро меняется, и альтернатива теперь часто используется, когда требуется существительное, и альтернатива , когда требуется прилагательное, но в медицинском контексте прилагательное , альтернативное , часто используется в отношении неаллопатической медицины, лечения или терапии.— Phil Sefton, ELS

1.Альтернатива / Альтернатива. В: О’Коннер PT. Горе мне: руководство для грамматикофобов по лучшему английскому на простом английском . 3-е изд. Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: Riverhead Books; 2009:88.

2. Коллегиальный словарь Merriam-Webster . 11-е изд. Спрингфилд, Массачусетс: Merriam-Webster Inc; 2003.

3. Фогарти М. Быстрые и грязные советы: «Альтернативный» против «Альтернативного». Сайт Grammar Girl. http://grammar.quickanddirtytips.com/alternate-versus-alternative.aspx. По состоянию на 16 января 2013 г.

4. Альтернативный; альтернатива. В: Гарнер Б.А. Оксфордский словарь американского употребления и стиля . Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: Издательство Оксфордского университета; 2000:18.

5. Альтернатива против альтернативы. Сайт грамматика. http://www.grammarist.com/usage/alternate-alternative/. По состоянию на 27 марта 2013 г.

6. Альтернативный, альтернативный. Сайт англоязычных форумов. http://www.englishforums.com/English/AlternateVsAlternative?bzxvg/post.htm. По состоянию на 16 января 2013 г.

7. Компактный Оксфордский словарь английского языка .2-е изд. Оксфорд, Англия: Издательство Оксфордского университета; 1991:41.

Родственные

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым файл cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее распространенные причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie.Вам необходимо сбросить настройки браузера, чтобы принять файлы cookie, или спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файл cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Попробуйте другой браузер, если вы подозреваете это.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie.Чтобы это исправить, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Предоставить доступ без файлов cookie потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой вами страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в файле cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файле cookie может храниться только та информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, если вы не решите ввести его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступ к остальной части вашего компьютера, и только сайт, создавший файл cookie, может его прочитать.

Как правильно использовать альтернативу в сравнении с альтернативой — Грамматист

Описанное различие настолько чуждо моему британскому уху, что я не совсем уверен, понял ли я его. Позвольте мне посмотреть, правильно ли я понял американское использование: —

Альтернатива похожа на дублера или резервную копию — что-то, что будет использоваться только в том случае, если обычно используемый предмет недоступен. Альтернатива дает свободный выбор; вы можете выбрать одну вещь в один день, а другую в другой, или придерживаться одной и той же вещи все время, или использовать любую другую модель использования.

Верно?

В Британии альтернативой является один из набора вещей, из которого можно выбирать, но в отличие от
американцев мы бы не беспокоились об этом, если бы размер набора временно был уменьшен до единицы. (Если множество всегда было одного размера, у вас нет альтернатив, только один принудительный выбор.) Например, если дорога закрыта и остается только один возможный маршрут, он всегда подписывается «Альтернативный маршрут», а не «Альтернативный маршрут». Маршрут»

Для нас альтернативы чередуются.Их должно быть ровно два, и они чередуются совершенно закономерно, то одно, то другое – подобно переменному току (направлениям), вырабатываемому генератором переменного тока. Альтернативы не имеют ничего общего с выбором, принудительным или иным.

Например, предположим, что недавно прибывший американский коллега предложил факультетам нашего колледжа избрать заместителей представителей в какой-то комитет. Если бы мои британские коллеги сказали (а я уверен, что так и было бы) «разве вы не имеете в виду альтернативу?» и получили бы ответ «нет», их следующим ответом было бы сказать, что это было бы похоже на создание двух разных комитетов. , встречи вдвое реже!

Я действительно не думаю, что вы должны сбрасывать со счетов эту позицию как историческую и указывать только американское использование на том основании, что оно неизбежно вытеснит британское (и я думаю, что, вероятно, другое неамериканское) использование.Я, конечно, не заметил, как американцы используют слово «альтернативный», вторгающееся сюда — или, может быть, я слышал это время от времени, но просто не принял его за ошибку, так как до прочтения этой статьи я понятия не имел, что это правильно в любой версии Английский.

Вы говорите, что ваши ссылки показывают американское использование в британских публикациях, но я не уверен. Статья The Guardian «Загадочные кроссворды для начинающих: альтернативные буквы» абсолютно соответствует британскому использованию слова «альтернативный», а не американскому.(Каждая вторая буква используется, те, что между ними, отбрасываются). Точно так же цитата Liverpool Echo «При чередующихся еженедельных сборах обычные отходы собираются одну неделю, а на следующей перерабатываются на постоянной основе» явно используется британцами, а не американцами. (Хотя лично я предпочел бы «чередовать».) То же самое для «Присоединяйтесь к регулярной волонтерской группе на острове Браунси в 9:30 утра по воскресеньям в течение года» и так далее, ссылка за ссылкой, ссылка за ссылкой.

Есть несколько примеров употребления в Америке — например, в обзоре фильмов Guardian приводится цитата из The Hollywood Recorder в косвенной речи, но не удосуживаются британизировать «альтернативный» на «альтернативный».В статье Daily Mail есть пример, но он опять из Голливуда и повторяет слова американца. В статье FT о маршрутах снабжения слово «альтернативный» используется один раз, а слово «альтернативный» — один раз, в то время как обычное британское употребление было бы «альтернативным» оба раза. Но, если я не неправильно понял американское словоупотребление, FT также не следует этому — оно использует «альтернативный», когда есть свободный выбор, и «альтернативный», когда это выбор Хобсона, так что я думаю, что «альтернативный» был просто ошибка. В Economist есть железный пример, но он есть в BTL-комментарии в блоге о второй инаугурации президента Обамы и, предположительно, американцем.

Короче говоря, я не думаю, что здесь есть различие между современным и архаичным использованием, но между использованием в США и Великобритании. Я не могу говорить за другие англоязычные страны, конечно.

Цилостазол как альтернатива аспирину после ишемического инсульта: рандомизированное двойное слепое пилотное исследование

Задний план: Большинству пациентов, перенесших инсульт, назначают аспирин; однако кровоизлияние в мозг, связанное с приемом аспирина, представляет собой осложнение, которое в настоящее время вызывает озабоченность, особенно в Китае, где высока частота кровоизлияния в мозг в программах вторичной профилактики и среди населения.Цилостазол, ингибитор фосфодиэстеразы 3 (ФДЭ3), является альтернативой аспирину, который работает по другому механизму. Это исследование было направлено на сравнение эффективности и безопасности цилостазола с аспирином для долгосрочной профилактики рецидивов ишемического инсульта.

Методы: 720 пациентов (средний возраст 60,2 года, стандартное отклонение 9,86), перенесших ишемический инсульт в течение предшествующих 1-6 месяцев, были последовательно включены в проспективное многоцентровое двойное слепое рандомизированное исследование.360 пациентов были рандомизированы для приема цилостазола и 360 пациентов для приема аспирина. Анализ был по намерению лечить. Пациенты обеих групп принимали препарат в течение 12-18 мес. Первичной конечной точкой был любой рецидив инсульта (ишемический инсульт, геморрагический инсульт или субарахноидальное кровоизлияние) в течение периода исследования. Всем пациентам выполняли МРТ с Т1 МРТ, Т2 МРТ, диффузионно-взвешенную визуализацию (ДВИ), Т2 инверсионное восстановление с ослаблением жидкости (FLAIR) и градиентное эхо Т2 (Т2*) в начале и в конце исследования.Это исследование зарегистрировано на сайте ClinicalTrials.gov под номером NCT00202020.

Результаты: Средняя продолжительность лечения составила 740 человеко-лет, было проанализировано 719 пациентов (360 в группе цилостазола и 359 в группе аспирина). О первичной конечной точке сообщалось у 12 пациентов в группе цилостазола и у 20 пациентов в группе аспирина. Расчетное отношение рисков, рассчитанное с помощью кривых Каплана-Мейера (риск первичной конечной точки в группе цилостазола по сравнению с группой аспирина), равнялось 0.62 (95% ДИ 0,30–1,26; р=0,185). Симптоматическое кровоизлияние в мозг было зарегистрировано у шести пациентов: у одного в группе цилостазола и у пяти в группе аспирина. Бессимптомная гематома головного мозга была обнаружена у четырех пациентов в группе аспирина и у одного пациента в группе цилостазола. Кровоизлияния в мозг значительно чаще встречались в группе аспирина, чем в группе цилостазола (7 против 1, p = 0,034). У всех шести пациентов с симптоматическими кровоизлияниями ранее были микрокровоизлияния в мозг в области расположения гематомы.

Интерпретация: Результаты этого пилотного исследования не показали существенной разницы в частоте рецидивов инсульта между пациентами с ишемическим инсультом, которые были рандомизированы для приема либо цилостазола, либо аспирина. Более низкая частота ишемического и геморрагического инсульта в группе цилостазола предполагает, что цилостазол может быть более эффективной и безопасной альтернативой аспирину для китайских пациентов с ишемическим инсультом; однако для подтверждения этого требуется более крупное исследование фазы III.

Финансирование: Национальное министерство здравоохранения Китайской Народной Республики; Оцука Фармасьютикал.

Как учеников высылают в альтернативные школы — ProPublica

В октябре 2014 года, менее чем через два месяца после поступления в среднюю школу Северной Огасты в округе Эйкен, Южная Каролина, Логан Ревис остановился, чтобы попить из фонтана в коридоре между уроками.Когда он выпрямился, вода изо рта попала на ботинок его учителя обществознания Мэтта Брэнона, который стоял рядом. Логан говорит, что это был несчастный случай, но Брэнон подумал, что Логан плюнул в него.

«Плохо», — сказал 15-летний юноша с густыми песочно-каштановыми волосами и голубыми глазами Бранону после того, как учитель заговорил с ним.

Бранон, который также является школьным тренером по бейсболу, был в ярости. — Чертовски отвратительно, — крикнул он Логану, когда подросток ушел.Брэнон преследовал Логана и схватил первокурсника за рюкзак.

«Убери от меня свои чертовы руки, — вспоминает крик Логан. Представители школы говорят, что он использовал другое слово на букву «ф».

Получите наши главные расследования

Подпишитесь на рассылку новостей Big Story.

Хотя Бранон, возможно, обострил конфликт, его не наказали — но Логан был. Решением, которое изменило курс его образования и жизни, школьный округ изгнал Логана в альтернативную школу, Центр инновационного обучения в Пайнкресте.

Слово «альтернатива» подразумевает выбор. Но в эпоху, когда свобода выбора школы провозглашается защитниками и политиками, учащиеся не выбирают альтернативные школы, в которые округа отправляют их за нарушение правил: они приговариваются к ним. Из 39 департаментов образования штатов, принявших участие в опросе ProPublica в прошлом году, 29, или около трех четвертей, заявили, что школьные округа могут принудительно переводить учащихся на альтернативные программы по дисциплинарным причинам.

Как и Логан, тысячи учеников ежегодно принудительно переводят в эти школы, часто за, казалось бы, незначительное правонарушение, и никогда не возвращаются на правильный путь, как показало расследование ProPublica. Альтернативные школы часто располагаются в полуразрушенных зданиях или трейлерах, в классах преподаются в основном компьютеры и мало консультационных услуг или внеклассных занятий.

Принудительное размещение продолжается, несмотря на то, что администрация Обамы в 2014 году заявила школам, что они должны приостанавливать, исключать или переводить учащихся в альтернативные школы только в крайнем случае — и предупредил их, что они рискуют подвергнуться федеральному расследованию гражданских прав, если их дисциплинарные меры будут отражать дискриминацию по расовому признаку.Федеральные данные показывают, что чернокожие и латиноамериканские студенты часто наказываются сильнее, чем белые, за аналогичные нарушения.

Кроме того, несмотря на юридическую защиту, предоставляемую учащимся с ограниченными возможностями, непропорционально большое количество сосланных в некоторых округах имеют специальные планы обучения — например, у Логана, у которого был диагностирован синдром дефицита внимания с гиперактивностью и другие проблемы с обучением.

Школьная администрация «вывешивает этих детей сохнуть», — говорит мать Логана, Лиза Вудворд.«Они не хотят иметь с собой ничего общего».

Теперь на администрацию Трампа оказывают давление, чтобы она относилась к таким отстранениям более благосклонно. В ноябре группа учителей и сторонников консервативного образования встретилась с помощниками министра образования Бетси ДеВос, чтобы выразить обеспокоенность по поводу руководства 2014 года. Группа заявила, что подход эпохи Обамы сделал школы менее безопасными, позволив учащимся, нарушающим порядок, захватывать классы.

Эта встреча вызвала у защитников гражданских прав опасения, что администрация Трампа отменит указание, что побудит школы увеличить число детей, исключенных из обычных классов.«Мы глубоко обеспокоены тем, что эта администрация не стремится защищать гражданские права студентов», — говорит Элизабет Олссон, старший научный сотрудник Фонда правовой защиты NAACP. Она сослалась на сообщения о том, что ДеВос может отказаться от правила, направленного на то, чтобы школы не помещали учащихся из числа меньшинств без необходимости в специальное образование.

Представитель федерального управления образования 29 ноября отказался комментировать этот вопрос.

Безусловно, многих учащихся отправляют в альтернативные школы за серьезные правонарушения, связанные с наркотиками, алкоголем, оружием или насилием.Но другие вынуждены уйти из-за грубости, использования мобильных телефонов в неподходящее время или — примерно в половине опрошенных ProPublica штатов — недисциплинарных проблем, таких как плохие оценки. В таких штатах, как Флорида, учащихся, которые не успевают в учебе, заставляют переводиться в альтернативные школы, чтобы обыграть систему подотчетности штата. Закон штата Пенсильвания позволяет школьным властям направлять учащихся в программу «Альтернативное образование для деструктивной молодежи» этого штата за проявление «неуважения к школьному начальству».В Айкене около 40 процентов переводов в 2014-2015 годах, когда Логана переназначили, были за менее серьезные правонарушения, в том числе 13 за использование ненормативной лексики, 27 за прогулы, 28 за невыполнение инструкций взрослого и 18 за проявление неуважения.

Изгнан за неуважение

Иногда даже менее серьезные дисциплинарные проступки приводят к тому, что учеников отправляют в альтернативную школу.

Исключен за неуважение12415183322121281324384273ЗапугиваниеНарушение правил приличия в отношении мобильного телефонаНеуважениеРазрушение1Виновен по ассоциацииЗаигрываниеНеуместные комментарииНенадлежащее использование школьных материаловПокидание школыЛожьНесоблюдение указаний взрослыхНенормативная лексикаКражаУгрозаНезаконное проникновениеПрогулыВандализм

Из 568 дисциплинарных нарушений, которые привели к переводу в альтернативную школу в Эйкене, Южная Каролина, в 2014-2015 учебном году, около 40 процентов не были связаны с серьезными правонарушениями, такими как насилие, хранение наркотиков или алкоголя или оружия.

AASA, Ассоциация школьных суперинтендантов, которая время от времени яростно защищала свободу действий местных администраторов в отношении непослушных учеников, заявляет, что альтернативные школы, как правило, не должны использоваться в качестве наказания за несерьезные правонарушения.

«Мы не хотим посылать туда студента, потому что он не снял шапку, или плохо пил из фонтана, или он не такой воспитанный, как нам хотелось бы», — говорит Брайон Джоффе. , директор проекта ассоциации по образованию и молодежи и развитию.«Чего мы не хотим, чтобы наши альтернативные школы были местом для детей, которых мы бы не хотели иметь в классе».

Адвокат школ округа Эйкен Уильям Беркхалтер-младший говорит, что под руководством нового суперинтенданта Шона Алфорда школьная система сократила количество исключений, отстранений от занятий и принудительных альтернативных переводов в школу в последние годы. Тем не менее, по его словам, окружные чиновники действовали в рамках своих прав в случае с Логаном. «Он отрицает это, но он облил этого учителя огромным количеством воды», — говорит Беркхальтер, который сам не был свидетелем этого инцидента.«Его туфли, штанины, что угодно. Это было грубо». (Во время дисциплинарного слушания окружной чиновник описал инцидент так: «Ученик плюнул водой на ботинок учителя, когда выходил из фонтана».)

Беркхальтер говорит, что Брэнон работает в округе с 2012 года, не получая никаких жалоб или выговоров. «У директора не было проблем, и он говорит, что он командный игрок, охотно участвует во всем, с чем его просят помочь, и надежный парень», — написал Беркхальтер в электронном письме.Он процитировал слова директора: «Мне нравится, когда он работает в штате».

Брэнон не ответил на электронные письма или телефонные сообщения от ProPublica.

Дисциплина не была первоначальной миссией альтернативных школ. Они появились в конце 1960-х годов как менее конкурентоспособные, более ориентированные на ребенка учебные среды, которые были нацелены на гибкое обучение детей, которые не преуспевали в традиционных классах. Но в течение двух десятилетий их роль изменилась, поскольку школьные округа начали рассматривать их как места для складирования учащихся, нарушивших политику нулевой терпимости.В соответствии с этой политикой, которая основывалась на представлении о том, что школы могут поддерживать порядок, только отказываясь терпеть любое потенциально небезопасное поведение, даже первые или незначительные инциденты с большей вероятностью приведут к исключению или отстранению от занятий. Когда ученики оспаривали свое исключение, некоторые суды предписывали школам найти место для их обучения, что способствовало распространению альтернативных классов в 1990-х и 2000-х годах. Несмотря на то, что политика нулевой терпимости вышла из моды, принудительное помещение в альтернативные школы по дисциплинарным причинам сохраняется, а такие округа, как Майами, недавно открыли «центры успеха» для учащихся, которые в противном случае могли бы быть отчислены.

Подробнее

Альтернативным школам, которым поручено обучать около полумиллиона наиболее уязвимых учащихся страны, обычно не хватает академической строгости.Барбара Феддерс, профессор права Университета Северной Каролины в Чапел-Хилл, изучавшая школы, говорит, что некоторые округа направляют своих худших учителей в альтернативные классы, а учащиеся могут даже не получать учебников. «Им не дают ничего, что делало бы школу школой, — говорит Феддерс. «Нет ни клубов, ни спорта».

Многие студенты разочаровываются и бросают учебу. Анализ ProPublica показал, что в то время как только 6 процентов обычных школ имеют процент выпускников ниже 50 процентов, почти половина альтернативных школ имеет такой же показатель.

«Существует огромное изменение в качестве образования, которое учащийся получает при переходе из обычной школы в альтернативную», — говорит Дерек Блэк, профессор права Университета Южной Каролины, написавший книгу о школьной дисциплине. .


Средний ребенок, Логан вырос с двумя сестрами в Северной Огасте, в нескольких милях от границы с Джорджией. Когда он был малышом, его мать и отец расстались, и она вышла замуж за его отчима.Она работала в сфере обслуживания клиентов в автосалоне; его отчим работал на стройке, а позже устроился на работу автомобильным техником.

Логан мало общался со своим отцом, а его отношения с отчимом были бурными. Когда он не учился в школе, он любил плавать в близлежащих озерах или реке Саванна и демонстрировал умение выполнять практические задания. Какое-то время он и его друг любили чинить и перекрашивать старые велосипеды. Когда он стал подростком, он носил рубашки с эмблемой Polo, всегдашнюю бейсбольную кепку и широкую улыбку, которая намекала на озорство.

Из-за синдрома дефицита внимания и гиперактивности, который был диагностирован в третьем классе, Логан изо всех сил пытался сосредоточиться на учебе. Ему было трудно читать, и иногда он действовал импульсивно. Он мог быть шумным, плохо следовал указаниям и болтал со взрослыми, которые ругали его перед сверстниками. Он принимал лекарства от расстройства внимания в течение нескольких лет, но Вудворд прекратила их прием, когда училась в седьмом классе, потому что считала, что побочные эффекты заставляют его капризничать.

Его неоднократно наказывали за вспышки гнева в классе, неуважение, ругань, глупости и шалости с другими учениками.По мере того, как инциденты накапливались, Логан познакомился с районной альтернативной школой, Центром инновационного обучения в Пайнкресте. Расположенное в паре миль от центра Айкена низкое кирпичное здание с высокой травой, сетчатым забором и табличкой «Вход воспрещен» сзади. С колеблющимся набором, который иногда превышает 200 учеников третьего класса и выше, центр находится в районе, охваченном преступностью, с карманами заколоченных домов и неухоженными дворами.

В шестом классе школьные власти отправили Логана в Пайнкрест более чем на два месяца после того, как его обвинили в том, что он толкнул другого ученика.В следующем году он вернулся примерно на месяц за то, что неоднократно забывал свою спортивную одежду. Его оценки каждый раз страдали.

Для старшей школы его мать решила, что ему следует пойти в небольшую чартерную школу, где он мог бы получать индивидуальное внимание, а не в Северной Огасте. Северная Огаста, одна из крупнейших средних школ Айкена, насчитывает 1500 студентов и обширный кампус в старом районе, усеянном кирпичными ранчо середины века. Но Логан заверил ее, что с ним все будет в порядке. Он уже планировал продолжить профессиональную деятельность после первого года обучения и присматривался к программе сварки.Когда он покинул среднюю школу, педагоги разработали для него Индивидуальную программу обучения, в которой, среди прочего, говорилось, что учителя в Северной Огасте должны сначала напомнить ему о правилах и дать ему возможность соблюдать их, прежде чем выдавать цитату, и не должны ставить его в неловкое положение, критикуя его на публике.

Мать Логана, Лиза Вудворд, считала, что школьный округ слишком остро отреагировал на дисциплинарное происшествие с участием ее сына. Его отправили в альтернативную школу на 13 недель, а позже он бросил среднюю школу.(Трэвис Дав для ProPublica)

Первые несколько месяцев Логана в Северной Огасте прошли относительно хорошо. Он получил четверки по алгебре 1 и в основном избегал неприятностей. Он действительно опаздывал, неоднократно не успевая добраться из одного конца школы в другой вовремя к уроку. Другой учитель отчитал его за то, что он сказал, что у него нет книги, хотя на самом деле она была. Но его мать встречалась с его учителями, и все они говорили с Логаном о том, что нужно поторопиться.Он обещал.

Затем произошел инцидент с фонтаном. После этого помощник директора позвонил Вудворд и сказал ей, что Логан плюнул на учителя и может быть арестован за нападение, если будут предъявлены обвинения. «Я подумала: «Что случилось с моим ребенком?», — вспоминает она. «Потому что не в его характере ругаться на кого-то, а в том, чтобы плевать на кого-то, это было не в характере». Она была так расстроена, что почти не разговаривала с Логаном по дороге домой. Той ночью он сбежал из дома и в одиночестве бродил по их рабочему району, пока она с тревогой ждала своего часа.

Когда они, наконец, обсудили случившееся, Вудворд говорит, что она была удручена. «То, что я так отреагировала, разбило мне сердце», — говорит она.

Школа передала дело Логана в дисциплинарный трибунал, группу педагогов-пенсионеров, которые определили наказание за нарушения школьного кодекса поведения. Брэнон приложил немало усилий, чтобы подкрепить свою версию, собрав показания девяти студентов об инциденте. Большинство сошлись во мнении, что Логан плюнул в ботинок «Тренера Бренона», но не смогли точно сказать, было ли это намеренно.

Через несколько дней на слушании Вудворд попросил о снисхождении.

«Ему постепенно становится лучше», — сказал Вудворд членам трибунала, согласно записи слушания, полученной ProPublica. «Он не плохой ребенок, он хороший ребенок». Но председатель сказала Логану, что его поведение недопустимо. «Ты никогда не выиграешь, проявляя неуважение к ответственным лицам», — сказала председательница Логану. Преобладание доказательств подтверждает, что он плевал и ругался на учителя, сказала она, когда слушание закончилось, но даже «если вы этого не сделали, то это урок, что создание впечатления, что вы это сделали, иногда может быть столь же болезненным, как если бы вы сделал это.Ты получил это?» Она предупредила его, что если он снова предстанет перед трибуналом за другое правонарушение, его, скорее всего, исключат.

Коллегия приговорила его к краткосрочному заключению в Пайнкрест, которое обычно длится от четырех до пяти недель. Однако, когда Вудворд записывала его в альтернативную школу, по ее словам, школьные чиновники из его старой средней школы встретились, чтобы обсудить его IEP без нее. На этом собрании, несмотря на рекомендацию трибунала, руководство школы решило, что Логан должен остаться в Пайнкрест дольше — по крайней мере, на девять-десять недель.«У него все было так хорошо, что из-за этого небольшого инцидента, который они раздули до предела, они практически пинали его, пока он был в упадке», — говорит Вудворд.

Администрация школы «не чувствовала, что мать вообще когда-либо понимала, с чем они мирятся и как сильно они хотят, чтобы Логан преуспел», — говорит адвокат Беркхальтер.

Школа №

Пайнкрест была намного меньше школы Северной Огасты, и Логан знал там некоторых других учеников. Обычно его возила мать, хотя дорога занимала у нее час, и она боялась поставить под угрозу свою работу в автосалоне.

Центр инновационного обучения был совсем не таким. Хотя маленькие классы в Пайнкресте сняли нагрузку с Логана, он мало чему научился. Его компьютерные курсы по общественным и естественным наукам требовали, чтобы он поглощал экраны и экраны текста. «Мне нужно было много чего прочитать, а я не очень хорошо читал, — вспоминает он. По его словам, некоторые дети придумали способ обойти школьное программное обеспечение для просмотра сторонних веб-сайтов, таких как Facebook. По его словам, другие уроки, которые преподавали учителя, были слишком легкими для первокурсника средней школы — его математический класс провел время, занимаясь умножением на калькуляторах.

«Меня вообще ничему не научили, — говорит Логан. Его оценки на компьютерных курсах резко упали.


Штаты и школьные округа создали набор правил, определяющих, кто и почему должен посещать альтернативные государственные школы. Некоторые устанавливают более высокую планку, чем другие. В штате Делавэр учащиеся должны быть отчислены или «серьезно» нарушить дисциплинарный кодекс округа, прежде чем их отправят на альтернативные программы. В Остине, штат Техас, учащиеся, совершившие одно из перечисленных правонарушений, включая уголовные преступления, нападения с травмами и хранение марихуаны или алкоголя, должны быть переведены в альтернативные классы.

Государственные школы округа Майами-Дейд обратились к альтернативным школам после того, как столкнулись с давлением со стороны родителей и активистов, требующих сократить количество отстраненных и исключенных учеников. В 2015 году округ открыл 10 «Центров успеха учащихся» для учащихся, которых в прошлом отправили бы домой при отстранении от занятий. Согласно плану округа, такие учащиеся будут отмечаться в центрах и получать школьные задания от своих учителей — чтобы они не отставали — наряду с воспитанием характера и консультациями, если это необходимо.Этот шаг резко сократил количество отстранений от занятий за пределами кампуса. Но средства массовой информации и защитники гражданских прав вскоре сообщили, что многие ученики не появлялись в центрах успеха, а если и появлялись, то школьные задания из их текущих классов часто не приходили. «Центры успеха учащихся — это отстранение от школы под другим названием», — заявили в своем октябрьском отчете «Проект развития» и группа защиты интересов учащихся.

Представитель округа Майами-Дейд заявил, что центры улучшились благодаря рекомендациям целевой группы, в которую входят администраторы, учителя, консультанты и группы родителей и учителей.«Мы продолжим использовать отзывы всех заинтересованных сторон для обоснования решений», — написал представитель в электронном письме.

Независимо от формальных правил отбора в альтернативные школы, местные чиновники обычно пользуются широкой свободой действий. Это, говорят критики, позволяет проникнуть предвзятости.

В Пенсильвании в жалобе, поданной защитниками образования в Отдел гражданских прав Министерства юстиции США в 2013 году, утверждается, что альтернативные школы штата не соответствуют образовательным стандартам и непропорционально состоят из учащихся с ограниченными возможностями или афроамериканцев.Согласно жалобе, которая находится на рассмотрении, процент учащихся с ограниченными возможностями, отправленных на альтернативные программы штата, почти в три раза превышал средний показатель по штату, составляя 44 процента альтернативного населения в 2012 учебном году. В 82 школьных округах Пенсильвании учащиеся-инвалиды составляли половину или более альтернативного населения, при этом в одном округе для участия в программах были назначены только учащиеся-инвалиды. В период с 2008 по 2011 год афроамериканские студенты были включены в альтернативные программы более чем в два раза по сравнению с обычным учащимся.

Подробнее

Обвинения в предвзятости при альтернативном размещении также появились в крупнейшем школьном округе штата Миссисипи — школах округа ДеСото к югу от границы с Теннесси.Синтия Льюис говорит, что принудительный перевод ее дочери Ариауны Макмиллиан в альтернативную школу в прошлом учебном году в округе ДеСото был чрезмерно суровым наказанием, которое отбросило афроамериканского подростка назад в учебе.

Ближе к концу первого года обучения, как сказала А’риона ProPublica, она достала свой мобильный телефон, находясь в дамской комнате, чтобы использовать приложение Snapchat. Затем она повесила телефон над прилавком, который, как она думала, занимала подруга, с которой она дурачилась.Свет на телефоне замигал, предупреждая, что он вот-вот начнет запись. Подруга А’риауны заметила это и закричала, что она в другой кабинке. А’риона говорит, что она выхватила свой телефон и на всякий случай начала нажимать «Удалить». Когда девушка из киоска, которая была белой, вышла, А’риона позволила ей взглянуть на телефон и прокрутить ленту А’риауны в Snapchat, чтобы убедиться, что ничего не было опубликовано или сохранено. Девушка все равно пожаловалась администраторам.

А’риона была хорошей ученицей, у которой никогда раньше не было проблем.Школа не только отстранила ее от занятий на три дня, но и направила на дисциплинарное слушание для рассмотрения вопроса о дополнительном наказании. Судья приказал Ариауне провести 30 учебных дней в альтернативной школе округа за «действия, которые угрожают безопасности или благополучию других», «владение или использование непристойных, аморальных или оскорбительных материалов» и три менее серьезных правонарушения. в том числе наличие мобильного телефона. Льюис говорит, что кодекс округа не рекомендует альтернативное размещение для первого правонарушения по такому обвинению.«Мне казалось, что ее ругают», — говорит Льюис, который работал водителем автобуса и замещал учителя в округе. Она боялась, что ее дочь отстанет по биологии и английскому языку — по тем предметам, по которым этой весной проводились обязательные государственные тесты.

Когда той осенью А’риона вошла в альтернативный центр округа ДеСото, она испугалась. «Это было похоже на: «Боже мой, мама, они как в тюрьме», — сказала она Льюису. Каждое утро ее обыскивали, в том числе требовали встряхнуть лифчик, чтобы показать, что у нее нет контрабанды.Она сказала матери, что в большинстве дней она будет делать рабочие листы, а большую часть остального времени будет раскрашивать картинки мелками и фломастерами. Когда ее пребывание в альтернативном центре закончилось, мать перевела ее в другую среднюю школу, опасаясь, что старая не будет относиться к ней справедливо. А’риона обнаружила, что ей нужна дополнительная помощь учителей, чтобы вернуться в нужное русло. Переход был трудным. «Вначале она была очень подавлена, — говорит ее мать. По словам Льюиса, с помощью учителей и упорным трудом ей удалось поднять свои оценки.

Работая с Advancement Project, той же группой, которая критиковала центры успеха Майами, Льюис и другие родители ДеСото подали жалобы в Управление гражданских прав Министерства образования США. «Наказания, полученные Ариауной, были более суровыми и несовместимыми с теми, которые разрешены политикой округа», — написала ее мать в жалобе. Родители говорят, что администрация ДеСото, состоящая преимущественно из белых, и школьный совет обычно применяют более суровые наказания к чернокожим учащимся, чем к белым учащимся, совершающим аналогичные правонарушения.Жалобы находятся на рассмотрении.

Кэтрин Нельсон, пресс-секретарь школьного округа, в котором обучается около 34 000 учеников, отказалась обсуждать опыт Ариауны или жалобы родителей на предвзятость. «Мы не можем обсуждать вопросы студенческой дисциплины», — сказала она.


Доступных данных, сравнивающих, как часто учеников разных рас отправляют в альтернативные школы за одно и то же правонарушение, немного. Но федеральные данные за 2012 год документируют расовую предвзятость при отстранении студентов от занятий за менее серьезные правонарушения, по словам Иоффе из ассоциации суперинтендантов.По словам Иоффе, в 5 процентах правонарушений, которые считались бы наиболее серьезными — когда наказания были обязательными в соответствии с законом или правилом штата, потому что они были связаны с наркотиками, алкоголем, оружием или насилием — к студентам разных рас относились одинаково. Но в более широком круге правонарушений, по которым чиновники имели больше свободы действий при принятии решения об отстранении студентов, их решения выявили огромные расовые различия. «Мы знаем, что цветные дети подвергаются дисциплинарному взысканию чаще и, что более важно, более сурово за те же нарушения, чем их белые и азиатские сверстники», — говорит Йоффе.

Администрация Обамы призвала педагогов также избегать чрезмерно карательных мер в ответ на плохое поведение учащихся-инвалидов. В письме к педагогам в 2016 году говорится, что неоднократное дисциплинарное взыскание детей с ограниченными возможностями может свидетельствовать о том, что они не получают надлежащей поддержки в школе.

В обычных школах должны быть «выпускные клапаны» для учащихся, которые мешают занятиям — например, отправляют их в кабинет школьного консультанта или отстраняют от занятий в школе, — что не влечет за собой исключения их из обычной школы, говорит Йоффе.По его словам, альтернативные школы должны быть зарезервированы для учащихся, которые нуждаются в услугах, выходящих за рамки того, что может предложить обычная школа, — таких как лечение от наркозависимости, управление гневом или консультирование по травмам.

В последние годы, столкнувшись с критикой за исключение учащихся, некоторые школы обратились к более мягким методам борьбы с деструктивным поведением. Один из методов, называемый «поддержка позитивного поведения», включает в себя обучение учащихся улучшению поведения с помощью вознаграждений, поощрений и изменений в их среде и распорядке дня.Восстановительное правосудие, при котором учащиеся возмещают ущерб за плохое поведение вместо сурового наказания, также получило сторонников.

Школьный округ Айкен, который обслуживает около 25 000 учащихся, около трети из которых являются афроамериканцами, официально не принял ни поддержки положительного поведения, ни восстановительного правосудия. Но за последние два года округ реформировал как свой кодекс поведения, так и систему трибуналов, и суперинтендант Алфорд сказал родителям, что дисциплина должна быть поучительной, а не просто карательной.Из-за изменений меньше правонарушений приводит к автоматическому направлению к суровому наказанию. И школьная администрация теперь должна сначала задокументировать, что они сделали, чтобы попытаться помочь ребенку исправить плохое поведение, прежде чем направлять его для исключения, отстранения от занятий или альтернативного перевода в школу. Округ нанял на полную ставку судебного исполнителя, который заменил трибунал и обладает большей гибкостью в работе с семьями после дисциплинарного инцидента. Цель, по словам Беркхальтера, состояла в том, чтобы сократить количество отчислений, количество слушаний и апелляций и предоставить школьной администрации и учителям больше свободы действий в решении проблем с дисциплиной, «чтобы попытаться вернуть учащихся в нужное русло, а не пытаться вытолкнуть их из школы». дверь.

Хотя число учащихся в Пайнкресте осталось примерно таким же, по словам Буркхальтера, больше их прибывает в результате договоренностей между родителями и школьным округом после дисциплинарного инцидента. В целом, по его словам, ученики проводят меньше дней вне школы по дисциплинарным причинам. что приводит к меньшему количеству потерянных учебных часов.


Вернувшись в Северную Огасту после 13 недель пребывания в Пайнкресте, Логан сильно отстал от своих сверстников.«Я ничего не знаю об этом, вы намного опередили меня», — сказал он своему учителю математики. «Я не делал ничего подобного в альтернативной школе». Несколько недель спустя Логана поймали, когда он дважды за один день вынимал свой мобильный телефон из кармана, хотя студенты должны были оставлять его в своем шкафчике или машине. На этот раз школа рекомендовала исключение и провела специальное слушание, чтобы решить, связаны ли нарушения с его инвалидностью, что исключало бы суровое наказание. Хотя его мама утверждала, что изъятие мобильного телефона было импульсивным поступком, напрямую связанным с его СДВГ, сотрудники не согласились.Вудворд и ее сын не удосужились представить свое дело в трибунале. Им было достаточно. Чувствуя себя побежденным, Логан бросил школу весной 2015 года в возрасте 15 лет.

В то время Логан сказал себе и своей матери, что он просто получит соответствующий диплом или пойдет в специальную школу для детей из групп риска в Колумбии. Вместо этого он сразу же начал работать, переехав в Южную Джорджию, чтобы строить курятники для компании своего дяди, которая поставляет их на фермы.Через несколько месяцев он вернулся домой, устроившись на другую работу по ремонту систем отопления и кондиционирования воздуха, иногда работая по 55–60 часов в неделю. Его семья переехала через город в район, где они живут в аккуратном кирпичном доме с ухоженным газоном в конце тупика. Логан каждую неделю отдавал 100 долларов своей зарплаты на домашние расходы.

Логан Ревис управляет вилочным погрузчиком на предприятии своего дяди в сельской местности Джорджии. (Трэвис Дав для ProPublica)

В выходные дни он стрелял по тарелочкам или охотился на оленей с семьей и друзьями или спускался на дрэг-стрип, чтобы посмотреть скачки.Он обратился к своему отцу, который переживал тяжелые времена. Они встретились и начали развивать отношения. Но на этот раз, по словам его матери, Логан пытался быть образцом для подражания, призывая отца решать свои проблемы.

«Он стал взрослым, — говорит Вудворд. «Он просто взял это и убежал с этим».

В конце ноября Логан решил вернуться в Южную Джорджию и присоединиться к компании своего дяди, ремонтируя оборудование в птичниках. Он живет со своим двоюродным братом недалеко от Рейдсвилля, зарабатывая 14 долларов в час.«Он трудолюбивый, я думаю, это его заслуга», — говорит его тетя Дон Флойд. «Мы не могли дождаться, когда он доберется до нас».

Вудворд говорит, что гордится решимостью своего сына с тех пор, как он бросил школу, но она все еще скорбит о том, что он, скорее всего, никогда не получит традиционный аттестат о среднем образовании и пропустил школьные ритуалы, такие как церемония вручения колец, выпускной и выпускной бал. «Я думаю, что мне больно больше, чем ему», — говорит она.

Выходные, когда он уехал из Южной Каролины в Джорджию, были эмоциональными.После этого его мать отправила ему сообщение, в котором сообщила, что его младшая сестра скучает по нему.

Ему тоже было нелегко, ответил Логан, но он был полон решимости преуспеть, ради всех них. «Я стану миллионером, — писал он, — чтобы нам больше никогда не приходилось бороться».

Исследователь Клэр Перлман внесла свой вклад в этот отчет.

Неводный цвиттерионный растворитель в качестве альтернативы диметилсульфоксиду в медико-биологических науках

Клетки

Человеческий нормальный фибробласт-1 (hNF-1, KF-4009) был приобретен у Kurabo Industries Ltd.Человеческий нормальный фибробласт-2 (hNF-2) и mNF были любезно предоставлены профессором Эриком Сахаи (Институт Фрэнсиса-Крика, Великобритания) и описаны ранее 29 . Клетки рака молочной железы человека MDA-MB-231 и клетки меланомы человека WM266.4 также являются любезным подарком от профессора Эрика Сахаи. Клетки рака легкого человека PC9 и клетки почки собаки Mardin-Darby являются любезными подарками профессора Сэйдзи Яно (Институт исследования рака Университета Канадзавы) и профессора Эцуко Киёкава (Медицинский университет Канадзавы) соответственно. Первичные астроциты мышей были получены из умерщвленных новорожденных мышей C57BL6 (P1-3, самцы и самки), как сообщалось ранее 30 .Все клетки, кроме hNF-1, выращивали и поддерживали в виде монослойных культур при 37 °C в 5% CO 2 во влажной атмосфере с использованием DMEM (высокая глюкоза с L-глутамином и феноловым красным, Fujifilm Wako Pure Chemical Corporation), с добавлением раствора пенициллина-стрептомицина (×100) (Fujifilm Wako Pure Chemical Corporation) и 10 об.% FBS (Sigma-Aldrich Co., Llc.). Клетки субкультивировали каждые 4–6 дней, используя раствор трипсина (0,5% масс./об.% трипсина — 5,3 ммоль/л раствора ЭДТА·4Na без фенолового красного (×10), Fujifilm Wako Pure Chemical Corporation).hNF-1 выращивали и поддерживали в виде монослойных культур при 37 °C в 5% CO 2 во влажной атмосфере с использованием DMEM (с низким содержанием глюкозы с L-глутамином и феноловым красным, Sigma-Aldrich Co., Llc.) и 5 об.% FBS (Thermo Fisher Scientific Inc.). hNF-1 субкультивировали каждый месяц с использованием раствора трипсина (0,25%, Nacalai Tesque, Inc.), приготовленного с фосфатно-солевым буфером Дульбекко (DPBS, без кальция, без магния, Thermo Fisher Scientific Inc.).

Исследование содержания ZIL в клетках

ZIL был синтезирован, как сообщалось 12 .Около 5 × 10 5 клеток инкубировали в 5% (вес/объем) ZIL в DMEM через 2 часа. Клетки механически измельчали ​​с помощью клеточного скребка в 2 мл метанола после шестикратной промывки PBS (каждая по 2 мл). Растворы центрифугировали и фильтровали перед проведением масс-спектрометрии (JMS-T100TD, JEOL Ltd) посредством ионизации электрораспылением. Объем клеток рассчитывали путем измерения радиусов клеток при микроскопическом наблюдении с помощью инвертированного микроскопа IX83 (Olympus Corporation).

Токсичность растворителей для клеток

Аналог ZIL 1 был синтезирован, как сообщалось 12 . Аналог ЗИЛ 2 был приобретен у Iolitech GmbH и использован после сушки. hNF-2 и mNF высевали в 96-луночные планшеты по 4 × 10 3 клеток в каждой лунке. В каждую среду добавляли растворители в указанных концентрациях. После культивирования в течение 24 ч жизнеспособность клеток исследовали с помощью CellTiter 96® Aqueous One Solution (Promega Corporation). hNF-1 высевали в 96-луночные планшеты по 2 × 10 4 клеток в каждой лунке.После 24-часового культивирования в смесях среда/растворитель в указанных концентрациях культуральную среду меняли на другую среду с добавлением 33 мг/мл нейтрального красного. Через 2 ч культивирования клетки промывали PBS и экстрагировали нейтральный красный цвет 0,1 М HCl–30% раствором этанола. Жизнеспособность клеток рассчитывали по поглощению при 650 нм (получено из нейтрального красного) и 550 нм (получено из самих клеток).

Моделирование МД

Клеточная мембрана в системе моделирования состояла из липидов диолеоилфосфатидилэтаноламин (ДОФЭ)–диолеоилфосфатидилглицерин (ДОФГ) в соотношении 3:1 (90 и 30 молекул соответственно).Липидный бислой помещали в центр прямоугольного периодического ящика, заполненного водой TIP3P и ZIL (с 8716 и 32 молекулами соответственно), где размер буфера между краями ящика и липидной моделью был установлен на уровне около 34 Å, а МД-моделирование клеточной мембраны в водном растворе ZIL с концентрацией 5 % масс. проводили с использованием программного обеспечения Amber18 и AmberTools19 31 .

Система клеточных мембран была оптимизирована и постепенно нагревалась от -253 до 37°C со скоростью 0,1°C/пс. Затем последовала динамика производства при постоянной температуре (37 °C) и давлении (1 бар) в течение 2.5 мкс. Молекулы липидов были описаны с помощью силового поля Lipid17 32 , а молекулы ZIL были смоделированы с использованием параметров GAFF. Моделирование МД выполнялось с использованием временного шага интегрирования 2 фс в сочетании с опцией SHAKE. Метод сетки частиц Эвальда (PME) был принят для дальнодействующих взаимодействий, а отсечка несвязывающих взаимодействий в координатном пространстве была зафиксирована на уровне 10 Å. Атомы, использованные для расчетов, показаны на дополнительном рис. 7. Научная Инк.) в соответствии с протоколом производителя. Вкратце, клетки инкубировали с 10 мкМ EdU в течение 1 часа. Затем клетки обрабатывали трипсином, фиксировали 4% PFA, пермеабилизировали и метили пиколиазидом Alexa Fluor 647. Затем клетки окрашивали 4′,6-диамидино-2-фенилиндолом (DAPI) и анализировали с помощью BD FACSAria TM III (BD Biosciences).

Иммуноблоттинг фосфо-Rb

Белковые лизаты обрабатывали в соответствии со стандартными процедурами и анализировали с помощью SDS-PAGE с последующим иммуноблоттингом.Готовые SDS-полиакриламидные гели (4–15% Mini-PROTEAN TGX Precast Gel) и система переноса Trans-Blot Turbo были приобретены у Bio-Rad. Связанные антитела обнаруживали с помощью вторичных антител, конъюгированных с IRDye680 или IRDye800, и анализировали с помощью системы Odyssey Imager (LI-COR. Inc.). В этом исследовании использовали следующие антитела: кроличье антитело против фосфо-Rb (Ser780) (9307) от Cell Signaling Technology и мышиное антитело против β-тублина (T7816) от Sigma-Aldrich Co., Llc.

Культура клеток: iPS-клетка

Линия iPS-клеток человека 201B7 была предоставлена ​​RIKEN BRC в рамках Национального проекта биоресурсов MEXT/AMED, Япония.Линию клеток выращивали и поддерживали путем культивирования фидерных клеток (SL10, Reprocell Inc.) при 37 °C в 5% CO 2 во влажной атмосфере с использованием среды клеток Primate ES (Reprocell Inc.), дополненной bFGF ( Fujifilm Wako Pure Chemical Corporation).

Клетки субкультивировали, когда клетки достигли 80% конфлюэнтности, с использованием клеточного скребка (AGC Techno Glass Co., Ltd) после обработки DPBS(-) (без кальция, без магния, Thermo Fisher Scientific Inc.) и раствор ЧТК. раствор ЦТК (0.25% трипсин + 1 мг/мл коллагеназы IV + 1 мМ CaCl 2  + 20% KSR в DPBS (-)) готовили с трипсином ((2,5%), без фенолового красного, Thermo Fisher Scientific Inc.), коллагеназой ( тип IV, порошок, Thermo Fisher Scientific Inc.), дигидрат хлорида кальция (Fujifilm Wako Pure Chemical Corporation), заменитель сыворотки Knock Out TM (KSR, Thermo Fisher Scientific Inc.).

Токсичность ZIL и ДМСО по отношению к iPS-клеткам

iPS-клетки удаляли из чашек при 80% слиянии с использованием раствора CTK и промывали DPBS (-).Удаленные клетки обрабатывали 0,5× раствором TrypLE Select. 0,5× Раствор TrypLE Select готовили из 50% TrypLE Select, без фенолового красного (Thermo Fisher Scientific) и 0,25 мМ ЭДТА (0,5 моль/л раствора ЭДТА (pH 8,0), Nacalai Tesque Inc.) в DPBS (-) для однократного культура клеток. Клетки собирали в среду с 10 мкМ Y-27632 (Fujifilm Wako Pure Chemical Corporation) и центрифугировали. Перед использованием супернатант удаляли.

Фидерные клетки высевали 1,25 × 10 4 клеток/лунку в 96-луночный планшет и культивировали в течение 1 дня в среде, содержащей bFGF и Y-27632, а iPS-клетки дополнительно высевали 5000 клеток/лунку и культивировали на 1 день.Питательную среду заменяли средой с добавлением ДМСО (CultureSure DMSO, Fujifilm Wako Pure Chemical Corporation) или ZIL. Клетки культивировали до тех пор, пока контрольный образец (не содержащий растворителей) не достиг конфлюэнтности на 80%. Жизнеспособность клеток подтверждали с использованием реагента для подсчета клеток SF (Nacalai Tesque Inc.). Культуральную среду заменяли средой с добавлением 10% реагента для подсчета клеток SF и инкубировали в течение 1 часа. После инкубации измеряли поглощение при 450 нм и переводили в жизнеспособность клеток с помощью стандартной кривой.

Количественное определение недифференцированных маркеров

Фидерные клетки высевали в количестве 1,25 × 10 4 клеток/лунку в 96-луночный планшет и культивировали в течение 1 дня, а iPS-клетки дополнительно высевали в количестве 5000 клеток/лунку и культивировали в течение 1 дня . Культуральную среду заменяли средой, включающей ДМСО или ZIL, и клетки культивировали до тех пор, пока контрольный образец (который не содержит растворителей) не достигал 80% конфлюэнтности. Суммарную РНК экстрагировали и преобразовывали в кДНК с использованием набора кДНК FastLane Cell (Qiagen).Экспрессию Nanog и Oct3/4 определяли количественно с использованием системы ПЦР в реальном времени LightCycler® 96 (Roche) и SYBR Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (95°C, 5 с; 60°C, 30 с; 40 циклов). Gapdh использовали в качестве внутреннего контроля. Последовательности праймеров следующие: Nanog , прямой: GACAGGGGGAGGGGAGGAGCTAGG, обратный: CTTCCCTCCAACCAGTTGCCCCAAAC; 3/4 октября вперед: CAACTGGCCGAAGAATAGCA, обратно: TCCCTGGTGGTAGGAAGAGTAAA; Gapdh вперед: CATCCCTGCCTCTACTGGCGCTGCC, обратно: CCAGGATGCCCTTGAGGGGGCCCTC.

Токсичность растворителей для эмбрионов рыбок данио

Все эксперименты на животных проводились в соответствии с протоколом, одобренным комитетом по экспериментам на животных Канадзавского университета. Штамм рыбок данио дикого типа, AB*, выращивали в системе циркуляционного аквариума (AQUA) при температуре 28,5 °C с циклом свет/темнота 14/10 ч и содержали в соответствии с рекомендациями комитета по экспериментам на животных Канадзавского университета. Эмбрионы инкубировали в среде E3 (5 мМ NaCl, 0.17 мМ KCl, 0,33 мМ CaCl 2 , 0,33 мМ MgSO 4 ), содержащие ДМСО или ZIL, от 1,5 до 24 hpf. Затем эмбрионы дважды промывали средой E3 и обрабатывали 1-фенил-2-тиомочевиной (Fujifilm Wako Pure Chemical Corporation) для предотвращения пигментации. Эмбрионы через 48 часов после оплодотворения окрашивали 0,6 мг/мл o -дианизидина (Tokyo Chemical Industry Co., Ltd) в течение 15 мин с последующей фиксацией 4% параформальдегидом (Fujifilm Wako Pure Chemical Corporation). Затем эмбрионы дважды промывали 0.1% Tween-20 (Sigma-Aldrich Co., Llc.) в PBS. Изображение эмбрионов в видимом свете получали с помощью микроскопа Axiozoom V16 (Carl Zeiss AG) с цифровой камерой TrueChrome II (BioTools Inc.) и программным обеспечением TCapture (версия 4.3.0.602) (Fuzhou Tucsen Photonics Co., Ltd).

Анализ растворимости лекарств

Лекарства (1 мас.%) добавляли к растворителям и перемешивали в течение 10 ч при комнатной температуре. Когда препараты не растворялись, растворы нагревали до 80 °С и перемешивали в течение 2 ч.Мы проверили, солюбилизированы ли лекарства, наблюдая за частицами лекарств с помощью инвертированного микроскопа (ECLIPSE Ts2, Nikon Corporation). Эритромицин, 3′-азидо-3′-дезокситимидин, 5-йодо-2′-дезоксиуридин, (+)-катехингидрат, L-адреналин, дезлоратадин, моногидрат золедроновой кислоты, тестостерон, эстриол и оксалиплатин были приобретены у Tokyo Chemical Industry. Co., Ltd и используется в том виде, в каком он был получен. Фторурацил, карбоплатин и цисплатин были приобретены у Fujifilm Wako Pure Chemical Corporation и использованы в готовом виде.Аденозин-3′-фосфат и инсулин были приобретены у Nacalai Tesque Inc. и использовались в готовом виде. l-Тироксин был приобретен у Sigma-Aldrich Co., Llc. и используется в том виде, в каком он был получен. Паклитаксел был приобретен у Funakoshi Co., Ltd и использован в том виде, в каком он был получен.

Анализ жизнеспособности клеток с цисплатином

MDA-MB-231 высевали по 5000 клеток на лунку в 96-луночный планшет и предварительно культивировали в течение 24 часов. Раствор цисплатина (10  мМ) готовили с использованием 25 или 50% (вес/объем) растворов ZIL или 100, 50 или 25% (об/об) растворов ДМСО и оставляли более чем на один день.Их добавляли в среду в предполагаемых концентрациях. После 72-часового культивирования жизнеспособность клеток исследовали с помощью CellTiter 96® Aqueous One Solution.

Криоконсервация

Растворы DMSO и ZIL готовили путем смешивания со сверхчистой водой или DMEM/FBS. Клетки (1 × 10 6 клеток) собирали в пробирки для образцов на 1,5 мл (Watoson Co., Ltd) и центрифугировали. После удаления супернатанта добавляли 100 мкл среды для замораживания и медленно пипетировали. Образцы хранились в течение 3–5 дней в ящике (г.Frosty, Thermo Fisher Scientific Inc.) для охлаждения со скоростью около –1 °C/мин в морозильной камере –85 °C. Замороженные образцы оттаивали, добавляя культуральную среду при 37 °C. Количество живых клеток подсчитывали с помощью автоматического счетчика клеток (Countess II, Thermo Fisher Scientific Inc.) после окрашивания трипановым синим путем пипетирования в течение примерно 10 с. Относительное количество живых клеток определяется следующим уравнением:

относительное количество живых клеток = подсчитанное количество живых клеток (образец)/подсчитанное количество живых клеток (контроль),

, где контроль представляет собой клетки, криоконсервированные с помощью имеющегося в продаже криопротектора, Среда для замораживания CultureSure (CS-FM, Fujifilm Wako Pure Chemical Corporation).

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *